ГОСТ Р ИСО 10993.10-99
Внутривенное введение соответствующих прижизненных красителей, таких как трипановый си
ний или Evans blue, сделанное перед последним (72 ч после введения вытяжки) обследованием живот
ных. позволяет лучше оценить реакцию на внутрикожное введение вещества, окрашивая места воз
никшего раздражения.
Для оценки по возможности применяют методы, наименее травмирующие животных.
5.4.7 Оценка результатов
Определяют индекс первичного раздражения, при этом для каждого животного складывают
баллы первичного раздражения, включая эритему и отек, отдельно для каждой исследуемой вытяжки,
учитывая каждый интервал времени наблюдения, и делят на обшее количество наблюдений. Такие же
расчеты производят для участков, на которые воздействуют контрольным раствором. Разность баллов,
полученных для исследуемого материала и контрольного раствора, дает балл первичного раздражения,
который используют для вычисления индекса первичного раздражения.
Используют наблюдения, полученные только через 24, 48 и 72 ч после введения.
Для получения индекса первичного раздражения (ИПР) складывают баллы первичного раздра
жения каждого животного и делят на обшее число животных.
Т а б л и ц а 5 —Степени ответной реакции на раздражение у кроликов
О теч н ая реакция
Количество баллов
Отсутствие
Слабая
Умеренная
Выраженная
От О до 0.4
и 0.5 * 1.9
* 2.0 »4.9
и 5,0 »S.0
Оценка в баллах и описания, прелстааленные в таблице 5, характеризуют индексы первичного и
суммарного раздражения.
5.4.8 Представление результатов
Вотчет об исследовании включают:
- описание исследуемого образца;
- предполагаемый способ применения материала или изделия;
- подробное описание подготовки образца к исследованиям;
- вид экспериментальных животных;
- способ аппликации исследуемых образцов;
- методы ведения наблюдений и их регистрации;
- оценку результатов.
6 Исследование сенсибилизирующего действия
Существует несколько методов изучения сенсибилизирующего действия на коже морских свинок.
Обычно применяют два метода: метод максимального сенсибилизирующего воздействия (Magnusson &
Kigman) и метод закрытых накожных аппликаций (Buehler). Исследования проводят, используя один из
этих методов. Метод максимального сенсибилизирующего воздействия в соответствии с 6.2 более
чувствителен и является предпочтительным, особенно при оценке вьпяжек из материалов и изделий.
Перечень альтернативных методов приведен в приложении Д.
6.1 Факторы, которые следует учитывать при выборе метода
При выборе метода учигывают биохимические и физические характеристики исследуемого мате
риала. Метод максимального воздействия требует внутрнкожного введения, следовательно, если иссле
дуемый материал нельзя ввести внутрнкожно. в качестве альтернативного используют метод накож
ных аппликаций.
Выбранный растворитель должен повышать чувствительность метода благодаря частичному
растворению материала и проникновению в более глубоколежащие слои. Концентрация исследуемого
материала должна быть максимально возможной, но не оказывать влияния на интерпретацию резуль
татов. Важным фактором при местном воздействии является концентрация материала на поверхности
кожи, а не его объем. Возможности метода накожных аппликаций будут рассмотрены ниже.
Невозможно избежать повреждения кожи, если внутрнкожно вводят адьювант Фрейнда.
10