ГОСТ Р
ИСО
10993.10-99
Голова
Внутрикожное
введение по 0,1 мл
1001
2002
3оО 3
Межлопаточная
область
Хвост
Рисунок 3 —Расположение точек внугрикожных инъекций
- исследуемый материал или вытяжку из него в концентрации, которая определена в предвари
тельном эксперименте, смешивают с полным адъювантом Фрейнда и растворителем, взятыми в соот
ношенииV / V = 50/50; контрольным животным вводят только растворитель, смешанный с
адъювантом.
6.2.4.3.2 Фаза местного воздействия
Через семь дней после внутрикожного введения начинают накожные аппликации исследуемого
материала или вытяжки из него на спину в области лопаток каждого животного, используя для этого
пропитанные материалом или вытяжкой кусочки фильтровальной бумаги размером 20 40 мм. При
этом используют концентрацию согласно 6.2.4.2а и соответствующуюфиксирующую повязку. Повяз
ку и кусочки фильтров удаляют через (48 ± 2> ч.
Процедуру с контрольными животными повторяют в том же режиме, используя только раство
ритель.
Если максимальная концентрация, которая получена в соответствии с 6.2.4.2а. не вызывает
раздражения, проводят обработку участка 10 %-ным раствором лаурилсульфата натрия в вазелине за
(24 ± 2) ч до начата местных аппликаций. С контрольными животными поступают подобным образом.
6.2.4.3.3 Провокационная проба
Через 14дней после фазы местного воздействия проводят провокационную пробу исследуемого
материала или вытяжки с подопытными и контрольными животными. Для этого делают аппликации
исследуемого материала или вытяжки на кожу бока каждого животного, используя соответствующие
кусочки фильтров, пропитанные исследуемым материазом или вытяжкой из него в концентрации
согласно 6.2.4.26. и фиксирующие повязки. Повязку и кусочки фильтров снимают через (24 ± 2) ч.
П р и м е ч а н и е —Допускается провозить аппликации раствора с уменьшенной концентрацией на
другие учаспси кожи по той же методике.
6.2.5 Обследование животных
Осматривают поверхность участков, где проводили провокационную пробу подопытных и конт
рольных животных, через 24. 48, 72 ч после снятия повязки.
Описывают и оценивают степень кожной реакции, включая эритему и отек, в соответствии с
таблицей 6 для каждого участка и в каждый интервал времени наблюдения.
6.2.6 Оценка результатов
Если оценка в баллах, полученная в подопытной группе, равна 1или выше, о наличии сенсиби
лизации говорят в том случае, если у контрольных животных этот показатель менее 1. Если оценка в
баллах у контрольных животных равна 1или выше, то реакция кожи подопытных животных, которая
превышает самую сильную реакцию, наблюдаемую в контроле, является результатом сенсибилизации.
Иногда в подопытной группе у большего, чем в контроле, числа животных выявлен сенсибили
зирующий эффект, однако интенсивность реакции не выше, чем у контрольных животных. В этом
случае проводят дополнительную провокационную пробус целью получить более четкий ответ орга
низма. При необходимости дополнительную провокационную пробу проводят приблизительно через
7дней посте первой провокации. При этом применяют описанный выше метод, используя другой бок
животного.