ГОСТ Р 52688—2006
500 см3 раствора уксуснокислого натрия по 8.7.3.6 помещают в колбу вместимостью 1000 см3,
пипеткой добавляют 50 см3раствора уксусной кислоты по8.7.3.4. закрывают пробкой иперемешивают.
Срок хранения ацетатных буферных растворов — не более суток в посуде из темного стекла при
комнатной температуре.
8.7.3.9 Приготовление смеси растворов хлористого кальция и ацетатного буфера с объемным
соотношением СаС12иСН3СООН, равным 1:1
В мерную колбу вместимостью 50 см3вносят 25 см3раствора хлористого кальция no 8.7.3.2, дово
дят раствор до метки ацетатным буферным раствором no 8.7.3.7 и перемешивают.
8.7.3.10 Приготовление смеси растворов хлористого кальция и ацетатного буфера с объемным
соотношением СаС12иСН3СООН, равным 1:3
В мерную колбу вместимостью 100 см3вносят 25 см3раствора хлористого кальция по 8.7.3.2, объ
ем раствора доводят до метки ацетатным буферным раствором no8.7.3.8 иперемешивают.
Срокхранения растворов, приготовленных ло8.7.3.9 и8.7.3.10, — неболее 6 сут впосуде из темно
го стекла вхолодильнике при температуре от3 °С до 7 вС.
8.7.3.11 Приготовление растворадля разбавления pH 6,50
1580 см3ацетатного буферного раствора по 8.7.3.7, помещают в колбу вместимостью 2000 см3,
пипеткой добавляют20 см3раствора хлористого кальция по 8.7.3.2 и перемешивают.
Срокхраненияраствора — неболеесутоквпосуде изтемного стеклапри комнатной температуре.
8.7.3.12 Приготовление раствора молочного субстрата pH 6,50 (Ne 1. рисунок 1)
В водяную баню температурой (35 i 1) еС помещают колбу вместимостью 250 см3, содержащую
190 см3ацетатногобуферногораствора по8.7.3.7.Через 5—10 мин вколбу вносят (1,300±0.005)гсухого
обезжиренного молока. Оставляют раствор молока для набухания (20 ± 2) мин в водяной бане.
Затем перемешивают раствор молока на магнитной мешалке и вновь выдерживают его в водяной
бане 5 мин. После этого в колбу при непрерывном перемешивании раствора молока на магнитной
мешалке вно сят (10.0 ± 0.1) см3смеси растворов хлористого кальция и ацетатного буфера по
8.7.3.9 со скоростью (0,025± 0.005)см3/сс помощьюшприцевогодозатора Бустановки (см. рисунок
^.предназначенногодля дозирования молочного субстрата. Затем колбу с молочнымсубстратом
выдерживают 15 мин вводяной бане и 1ч при комнатной температуре втемном месте.
8.7.3.13 Приготовление раствора молочного субстрата pH 5,60 (N
p
2. рисунок 1)
В водяную баню температурой (35 ± 1) ’С помещают колбу вместимостью 500 см3, содержащую
285 см3ацетатного буферного растворапо8.7.3.8. Через 5—10мин вколбу вносят (0,300 ± 0,005)гсухо-
го обезжиренного молока. Оставляют раствор молока для набухания на (20 ± 2) мин. Затем перемеши
вают раствор на магнитной мешалке и выдерживают его в водяной бане 5 мин. После этого в колбу при
непрерывном перемешивании раствора молока намагнитной мешалке вносят (15,0 ±0,1) см3смеси рас
творов хлористого кальция и ацетатного буфера по 8.7.3.10 со скоростью (0,025 ±0,005) см3/с с по
мощью шприцевогодозатора Бустановки (см. рисунок 1). предназначенногодлядозирования молочно го
субстрата. Затем колбу с молочным субстратом выдерживают 15 мин в водяной бане и 1 ч при
комнатной температуре втемном месте.
Срок хранения молочных субстратов — не более суток в герметичной посуде втемном месте при
комнатной температуре.
8.7.3.14 Приготовление раствора контрольного образца говяжьего пепсина
Навеску
тл
контрольного образца говяжьего пепсина массой (0,300 ± 0.001) г помещают вмерную
колбу вместимостью 50 см3,добавляют 15—20 см3раствора для разбавления no 8.7.3.11и растворяют,
вращая колбу круговыми движениями инедопуская образования пены. Доводят объем растворадо мет
ки раствором для разбавления итщательно перемешивают. Раствор выдерживают 15 мин при комнат
ной температуре. Затем отбирают липеттером 1см3раствора, переносят вмерную колбу вместимостью
50 см3,доводят объем до метки раствором для разбавления и тщательно перемешивают.
П р и м е ч а н и е — Время достижения максимальной скорости роста оптической плотности раствора мо
лочного субстрата и (см. 8.7.3.12) при навеске т
1
должно находиться в пределах от 130 до 200 с. в противном слу чае
величину навески уменьшают, если и< 130 с, или увеличивают, если !л >200 с.
8.7.3.15 Приготовление раствора контрольного образца сычужного фермента
Раствор контрольного образца сычужного фермента готовят аналогично требованиям 8.7.3.14.
Навеску т 5,г, контрольного образца сычужного фермента рассчитывают по формуле
где т 4 — масса навески контрольного образца говяжьего пепсина, г;
17