24
ГОСТР 54354—2011
Окончание таблицы 2
Признак
Вид
С. jejuniC.coli
C. lariC. hyointestialis
C. upsaliensis
Продукция каталазы
Продукция оксидазы
Устойчивость:
к налидиксовой кислоте
к цефалотину
++
++
S
(d)
S
RR
++
++
RR
RS
—
+
S
S
П р и м е ч а н и е — Знак «+» — 90 % и более штаммов положительные; знак «—» — 90 % и более
штаммов отрицательные; V — от 11 % до 89 % штаммов положительные; S — чувствительные; R — устойчивые;
(с)
— незначительное образование H
2
S на свежем (менее 3 дней) ТСА;
(d)
— есть сообщение о штаммах,
чувствительных к налидиксовой кислоте.
8.13.2 Ускоренные методы анализа
8.13.2.1 МетодПЦРдляидентификациикампилобактерий
Сущностьметода — по 8.3.2.3.
Подготовка к проведению анализа — по разделам 4, 6, 7, 8.1 и [9].
Порядоканализаприидентификациибактерийрода Campylobacter: отборотдельных (3—4) колонийс
агаризированнойпитательнойсреды; посевматериаловизэтихколонийнаповерхностькровяногоКолум-
бийскогоагараилибульонадлябруцелл; инкубированиепосевов (42 ± 1) °Свтечение 48 чвмикроаэро-
фильнойатмосфере; подготовкаобразцовчистыхкультурклизису; проведениелизисаивыделениеДНК;
подготовкакпроведениюПЦР; амплификацияидетекция; оценкарезультатовидентификации.
Описаниепроцедурыпроведенияиучетарезультатованализа — по [9].
8.13.2.2 Иммунохроматографическийэкспресс-тестдлявыявлениякампилобактерий [11]
Подготовкакпроведениюанализа — по 4.2, разделам 6, 7, 8.1.
Сущностьметода — по 8.3.2.7.
Проведениеанализа
Селективное обогащение. Навеску анализируемого образца массой (25 ± 0,1) г или объемом
(25 ± 0,1) см
3
вносят в 225 см
3
селективного бульона Болтона. При необходимости анализа других масс
(объемов) образца их вносят в селективный бульон Болтона в соотношении 1 : 9 по объему. Твердые
образцы измельчают в гомогенизаторе. Объем воздуха во флаконе (пробирке) после посева не должен
превышать 10 % — 15 %. Если объем воздушного пространства превышает 15 %, то культивирование
проводятвмикроаэрофильныхусловиях, используядляэтогогазогенерирующиепакеты. Посевыинкуби-
руютвдваэтапа: первыйэтап — притемпературе (37 ± 1) °Свтечение 4ч; второйэтап — притемпературе
(41 ± 1) °С в течение (44 ± 2) ч.
Инактивацияисследуемойкультурымикроорганизма. 1 — 2 см
3
культуры, полученнойпослеселек-
тивного обогащения, переносят в пробирку. Инактивируют обогащенную культуру на водяной бане при
температуре 100 °Свтечение 15 мин. Оставшуюсяпослеобогащениякультуруиспользуютдляподтверж-
денияположительныхрезультатов.
Тестированиеинактивированнойкультуры. Инактивированнуюкультуруохлаждаютдокомнатной тем-
пературы. Переносят 0,16 см
3
инактивированнойкультурывлункудлявнесенияобразца.
Учетрезультатов. Через 20 мин послевнесенияобразцавлункуучитываютрезультаты. Проверяют
наличиелинийвтестовой (Т) иконтрольной (С) зонахтестовогоустройства. Результаттестасчитаютполо-
жительным, если красная линия присутствует как в тестовой (Т), так и в контрольной (С) зоне. Результат
тестасчитаетсяотрицательным, есликраснаялинияприсутствуеттольковконтрольной (С) зоне. Результат
тестасчитаютнедействительным, есликраснаялинияотсутствуеткаквтестовой (Т), такив контрольной
(С) зоне.
Положительныерезультаты подтверждаютпо 8.13.1.
8.13.2.3 Методиммуноферментногоанализа
Припроведениииммуноферментногоанализаиспользуютанализатор Vidas/mini Vidas.
Сущностьметода — по 8.3.2.4.
Подготовкаипорядоканализа — по [6].