13
Сальмонеллыприкультивированиинаэтойхромогеннойсредеобразуюткислотуизпропиленгликоля
и под воздействием изменения индикатора рН их колонии окрашиваются в красный цвет. Хромогенный
субстрат, также имеющийся в составе среды, гидролизуется ферментом
b
-галактозидазой, продуцируе-
мымколиформами, врезультатечегоколонииколиформныхбактерийприростенаэтойсредеприобретают
сине-зеленыйилисине-фиолетовыйцвет, аостальныеэнтеробактерииостаются бесцветны.
Плотныеселективныехромогенныесредыдругихтипов (приложениеА) длявыделенияиидентифи-
кациисальмонеллимеютпитательнуюосновуизнесколькихвидовпептоновисодержаттрихромогенных
субстрата, что обеспечивает рост всех штаммов Salmonella и позволяет определять их специфическую
ферментативнуюактивность. Дифференциацияштаммов Salmonella, втомчислесбраживающихлактозу,
отдругихбактерийосновананатом, чтопродуцентыэстеразыобразуютрозовыеилирозовато-лиловые
колонии. Прочиебактерииобразуютколониидругихцветов. Селективнаясмесьингибируетростбольшин-
стваграмположительныхбактерийидрожжей.
Посевматериаланаэтупитательнуюсредуосуществляютизжидкойселективнойсреды. Инкубиру-
ютпосевываэробныхусловиях 18 — 24 чпритемпературе 35 °С — 37 °С.
Полужидкиеагаризованныесредыпредназначеныдлявыявленияподвижныхштаммовсальмонелл,
диффузныйросткоторыхвтолщеэтихсредпроявляется отцентракпериферии (ГОСТР 52814).
Всоставпитательнойсредыпластин (подложек) дляанализасальмонелл входятпитательныевеще-
ства с добавлениемхромогенногосубстратаиантибиотика, например, новобиоцина. Посевпробывыпол-
няют из среды накопления: открывают поверхностную защитную пленку пластины (подложки), затем в
центрсредывносят 1 см
3
материалаитермостатируютпритемпературе 43 °Сдо 48 ч. Приэтомсальмонел-
лыформируютзеленыеиличерныеколониизасчетраспадахромогенногосубстрата, присутствующегов
среде. Средавокругколонийсальмонеллменяетцветсфиолетовогонажелтый. Привысокойконцентрации
колоний сальмонелл вся поверхность среды может быть желтого цвета. При выявлении на этой среде
подозрительныхнасальмонеллыколонийихидентифицируютпоГОСТР 52814.
Пластифицированныесреды пластин (подложек) другихтипов (приложениеА) могутсодержатьпита-
тельныевеществасдобавлениемхромогенногосубстратаидезоксихолатанатрия, ингибирующегорост
грамположительной микрофлоры. Посев пробы выполняют, как указано выше, термостатируют 24 ч при
температуре 35 °С. Сальмонеллыферментируютксилозуидекарбоксилируютлизиндокадаверина, что
сопровождаетсяповышениемрНивыделениемсероводорода, который, соединяясьсжелезом, образует
сульфитжелеза, придающийколониямчерныйцвет.
В состав пластифицированной среды подложек (пластин) для комплексного выявления
сальмонелл/Enterobacteriacae входитмодифицированныйагар, атакжесубстраты X-
a
-Gal (ферментируе-
мый
a
-галактозидазой) и Salmon-
b
-Gal (ферментируемый
b
-галактозидазой). Посевитермостатирование
пробы выполняют, какуказановыше. Приинкубациисальмонеллыформируютголубыеилизелено-голу-
быеколонии, втовремякакдругиеэнтеробактерииформируютколониипурпурногоцвета.
Результатыанализаоцениваютпокаждойпробеотдельно.
ИнтерпретациюрезультатованализавыявленныхкультурпроводятпоГОСТРИСО 7218.
Есликультурыпредположительноотнесеныкбактериямрода Salmonella, тоокончательнуюиденти-
фикациюпроводятпоГОСТРИСО 7218. Вэтомслучаерезультатывыявлениябактерийрода Salmonella
выдаютпослеполученияответапоокончательнойидентификации.
Результатыанализазаписываютследующимобразом: «бактериирода Salmonella обнаруженыилине
обнаружены в 25 см
3
жидкого или 25 г сухого продукта».
8.3.2 Ускоренные методы анализа
8.3.2.1 Подготовка и выполнение анализа — в соответствии с разделами 4, 6, 7, [3] — [5], [8],
[11], [20].
а) Методвыявленияиопределениябактерийрода Salmonella наосновегетерогенноготвердофазного
гибридизационногоДНК-РНКанализасхемилюминесцентнойдетекцией — по [5].
Этотметодявляетсяосновойфункционированиямикробиологическогоанализаторанабазепроби-
рочноголюминометра. Егоприменяютдляускоренноговыявлениясальмонеллнепосредственноизпро-
дуктовпитанияи/илиподтверждениявыделенныхмикробиологическимиметодамикультурэтихбактерий.
Общеевремявыявлениябактерийрода Salmonella составляет 24 — 48 ч.
Сущностьметода: основанидействуетнапринципегибридизацииучасткабактериальногогеномас
закрепленнымнатвердофазномносителе (стенкепробирки) комплементарнымкопределяемойпоследова-
тельностиДНКсальмонеллолигонуклеотиднымзондом, меченнымфлюоресцентнымкрасителем, спосле-
дующейдетекциейгибридовпостепенииххемилюминесценции.
ГОСТР 54354—2011