ГОСТ 202JSJ—T4 Стр. 32
лизма находятся в вегетавной форме, то будет наблюдаться рост
в иепрогретой пробирке. В случае наличия споровых форм рост
будет наблюдаться как в прогретой пробирке, так и в иепрогретой.
Рост С), botulinum характеризуется газообразованием и помут
нением среды.
Для приготовления мазков пастеровской пипеткой берут куль
туру со дна пробирки. Мазки окрашивают по Граму и микроско-
пиру ют.
Возбудитель ботулизма имеет вид палочек с закругленными
концами различной длины и ширины(в зависимости от типа),
часто коротких цепочек. Клетки со спорой имеют видракетки,
отделившиеся споры — овальные.Клетки в молодомвозрасте
грамположнтельные. При старении культуры(четырех и более
суток) появляются грамотрицательные палочки.
Для проведения биологической пробы при определении ботули-
нического токсина анализируемый материал растирают в ступке
со стерильным физиологическим раствором 1:4 и оставляют при
комнатной температуре на 1—2 ч, после чего центрифугируют при
3000 об/мин в течение 15—20 мин. Полученную надосадочную
жидкость можно хранить в холодильнике при температуре 4±2®С
и испытывать по мере необходимости. Пробы ставят на мышах.
Анализ на ботулинический токсин в мясе проводят следующим
образом. Вначале ставят реакцию нейтрализации со смесью про-
тнвоботулиничсских сывороток. Смешивают разные объемы моно
валентных сывороток типа А. В, С, Е, F и 0.6 см1 полученной сме си
добавляют в пробирку к 2,4 см3 исследуемого центрифугата. В
другую (контрольную) прбирку к 2,4 см3 исследуемого цектрифу-
гата добавляют 0.6 см3 физиологического раствора. Содержимое
пробирок перемешивают и выдерживают в течение 30 мин при тем
пературе 18—24°С. Для биологической пробы анализируемый цент-
рифугат вначале отбирают из контрольной, а затем из опытной
пробирки по 1 см3 и вводят двум белым мышам массой по 16—18 г
каждая. Осадок центрифугатасохраняют в холодильнике для
дальнейшего исследования.
Наблюдение за животными ведут на протяжении 2, 4, 6, 24 ч
в течение четырех суток.
При наличии ботулинического токсина две контрольные мыши
(которым вводился несмешанный с сывороткой центрифугат) бо
леют, а иногда погибают, у мышей, которым вводился смешанный
с сыворотками центрифугат, признаков заболевания ботулизмом
не наблюдается.
В случае гибели контрольных и опытных мышей реакцию ней
трализации повторяют с экстрактом мяса, разведенным в 5, 10,
20 раз, что дает возможность избавиться от веществ, вызываю
щих нехарактерную гибель мышей.
43