Стр. 27 ГОСТ 2023J.2—74
Обнаружение в препаратах-отпечатках коротких палочек с
закругленными концами и хорошо выраженной бнополярностью,
а в мазках из культуры — неспорообразуюшнх палочек, грамотри-
цательных, неподвижных и не имеющих биополярности, гибель ла
бораторных животных через 24—48 ч после заражения культура ми
указывает на возбудителя пастереллеза.
4.1.6. Определение стафилококков
4.1.6.1 Сущность метода заключается в выделении стафилокок
ков, установлении их патогенности в реакции коагулирования кро ви
кролика и определении дезоксирибонуклеазной активности.
4.1.6.2. Проведение анализа
Для проведения анализа из пораженных мышц готовят препа
раты, производят посев на мясо-пептонный агар по п. 4.1.1.
Из колоний, характерных для стафилококков, готовят мазки,
окрашивают их по Граму и мнкроскопируют. Стафилококки по
Граму окрашиваются положительно, имеют шарообразную форму,
располагаются группами различной величины, напоминающие
гроздья винограда, иногда поодиночке. После микроскопкрования
делают пересев на скошенный мясо-пептонный агар и помещают на
18—24 ч в термостат с температурой 37°С, после чего культуру
определяют на патогенность в реакции плазмокоагуляции. Плаз
му крови кролика, приготовленную по п. 3.2.24, разливают в две
стерильные пробирки, в одну из них вносят петлю стафилококко
вой культуры, другая пробирка служит для контроля. Внесенную
культуру тщательно размешивают, после чего обе пробирки
выдерживают 2—10 ч в термостате при температуре 37°С. Если
в указанное время коагуляции не произошло, то пробирки остав
ляют на 18 ч при комнаткой температуре. Если через 18 ч плазма
не свернулась, то анализируемую культуру стафилококков относят
к коагулазоотрицательной.
При получении положительной реакции плазмокоагуляции счи
тают, что в посевах обнаружен патогенный стафилококк.
Для определения дезоксирибонуклеазной активности стафило
кокков производят посев на среду, приготовленную по п. 3.2.26, и
выдерживают 18—20 ч в термостате при температуре 37°СГпосле
чего прибавляют 5 см3 1 н. раствора соляной кислоты. Через 2 —
3 мин ее сливают, а через 7—10 мин определяют результат реак
ции.
Положительной реакцией считают образование прозрачной зо
ны вокруг колонии, содержащей продукты расщепления ДНК, ко
торые не осаждаются соляной кислотой.
4.1.6.3. Обработка результатов
■Обнаружение грампложительных, расположенных гроздями
или поодиночке кокков, способных коагулировать плазму крови
38