ГОСТ Р 51331-99
7.19Метод определения бифидобактерии (Bifidobacterium) в биойогурте (посев на твердые среды)
Метод основам на высеве определенного количества продукта и (или) его разведений в агаризо-
ванные селективные питательные среды, культивировании посевов при оптимальных условиях, учете
результатов по характерным признакам и. при необходимости, определении морфологических свойств
обнаруженных микроорганизмов и их подсчете.
7.19.1 Отбор и подготовка проб
7.19.1.1Отбор проб биойогурта и подготовка его к анализу —по ГОСТ 9225 и 7.17.4.1 настояще
гостандарта.
7.19.2 Средства измерения, аппаратура, материалы и реактивы
7.19.2.1 Для проведения испытания применяют аппаратуру, материалы и реактивы по
ГОСТ 9225, а также дополнительно:
- мнкроанаэростат или эксикатор, или емкость с герметично закрывающейся крышкой:
- анаэробный агент: анаэробная система: AN 25 — supplier-OXOID;
- система для стерилизации фильтрацией фирмы Sartorius или аналогичные системы других фирм
(0,45 мкм);
- диклоксациллин Sigma D9016;
- питательная среда MRS. закупаемая по импорту;
- кукурузно-лактозная среда (ГМ К-1)для количественногоучета микроорганизмов по |8|.
7.19.3 Подготовка к испытанию
7.19.3.1 Растворы для приготовления разведений готовят в соответствии с ГОСТ9225 и 7.18.3.1
настоящего стандарта.
7.19.3.2 Питательные среды
7.19.3.2.1 Питательная среда MRS сдиклоксациллином
.19.3.2.1.1 Состав питательной среды MRS:
пептон- 10 г;
мясной экстракт-
10
г.
дрожжевой экстракт—5 г,
глюкоза-
20
г,
твин 80— I см’;
фосфат калия одно замещенный- 2 г,
ацетат натрия тригидрат— 5 г,
диаммоний нитрат
- 2 г,
сернокислый магний (MgS04 • 7Н .О)-0 ,2 г;
сернокислый марганец(MnS04 • 4Н О)—0.5 г.
агар
дистиллированная вода
- 15 г;
- 1000 см’.
7.19.3.2.1.2 Приготовление раствора селективного агента
Состав:
- диклоксациллин
- дистиллированная вода
—25 мг Sigma D 9016;
—50 см1.
Диклоксациллин растворяют в дистиллированной воде, затем полученный раствор стерилизуют
фильтрацией, срок хранения раствора — 15 сут при 4 *С.
В момент использования готовят разведение этого раствора 1:10.
7.19.3.2.1.3 Приготовление антиоксидантного раствора
Состав:
L-цистеин гидрохлорид
дистиллированная вода
—3 г Sigma С 7880;
—ИХ) см5.
Растворяют хлористый цистеин вдистиллированной воде, затем полученный раствор стерили
зуют фильтрацией. Раствор разливают по 10 см5встерильные пробирки. Хранят 15 сут при 4 ’С.
Приготовление питательной среды:
вносят 15 г агара в колбу с 500 см1дистиллированной воды, которую помещают в кипящую
водяную баню до полногорастворения агара. Вносят 55 гсухой среды MRS вдругую колбу с 500 см’
дистиллированной воды температурой 50 "С. Смешивают оба раствора и хорошо перемешивают. Если
17