ГОСТ 33917—2016
6.11.2 Подготовка к проведению анализа
6 11.2.1 Подготовка пробы анализируемого образца патоки
Для анализа готовят 1-процентный раствор патоки в пересчете на сухое вещество. Для этого
определяют массовую долю сухого вещества патоки по 6.6. 6.7 и вычисляют массу навески mv г, не
обходимую для приготовления 1-процентного раствора по формуле:
где 100 — коэффициент пересчета на сухое вещество патоки. %;
1— массовая доля сухого вещества в 100 г 1-процентного раствора, г.
тсо— массовая доля сухого вещества патоки. %.
Стакан с папочкой помещают на весы и устанавливают нуль, вносят массу навески патоки и при
ливают теплую бидистиллированную воду до (100,00 ± 0.01) г. Палочкой тщательно перемешивают рас
твор до полного растворения патоки. Приготовленный раствор фильтруют через мембранный фильтр в
сухую чистую пробирку или в виалу автосэмплора.
Подготовленную пробу анализируют в течение 1—2 ч после приготовления.
Подготовленная проба может храниться в течение 3 мес. в замороженном виде.
6.11.2.2 Приготовление стандартных растворов для определения времени удержания углеводов
Стандартные 1-процентные растворы углеводов (фруктозы, глюкозы, мальтозы и мальтотрио-
зы), а также их смеси готовят на бидистиллированной воде. В стеклянный стакан помещают наве ску
углевода, взятую с учетом содержания основного компонента реактива, приливают 10— 15 см3 воды,
растворяют и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, доводят его объем
водой до метки при температуре раствора 20 °С. Приготовленные растворы фильтруют через
мембранные фильтры в пластиковые пробирки. Пробирки закрывают крышками и замораживают в
холодильнике. В замороженном состоянии растворы углеводов хранят до одного года. Перед нача
лом работы растворы размораживают, используя для этого теплую воду или микроволновую печь в
режиме размораживания.
6.11.2.3 Определение времени удержания углеводов и оценка эффективности разделения
Включают хроматограф и настраивают его согласно инструкции по эксплуатации. Скорость потока
элюента, температуру термостата колонки устанавливают в соответствии с рекомендациями, приведен
ными в паспорте на хроматографическую колонку. Температура термостата детектора (50.0 ± 0,5) °С.
Для идентификации пиков углеводов необходимо определить время удержания углеводов. Для
этого поочередно анализируют стандартные растворы углеводов и их смесь.
Рекомендуется для определения времени удержания, вычисления площадей пиков и расчетов
применять интеграторы или компьютерные системы обработки хроматографических данных.
Относительное время Тх, с. удержания каждого углевода (х) вычисляют по формуле:
где tx — абсолютное время удержания каждого углевода, с;
tm — абсолютное время удержания глюкозы, с.
Эффективность хроматографической колонки по глюкозе, теоретические тарелки а вычисляют по
формуле:
где 5.54 — коэффициент;
tm— абсолютное время удержания глюкозы, с;
WbQ — ширина пика на уровне 50 % высоты, с.
Эффективность хроматографической колонки по глюкозе должна быть не менее 2000 теоретиче
ских тарелок.
6.11.3 Проведение анализа
Аликвоту пробы патоки, подготовленную по 6.12.2.1. вводят в хроматограф при помощи ручного
инжектора или автосэмплера. Объем аликвоты 20 мкл. Регистрацию сигнала детектора проводят при
помощи самописца, интегратора или компьютерной системы обработки хроматографических данных.
Проводят два параллельных анализа.
(18)
(19)
28