ГОСТ 7047—55 С. 33
Общий объем реакционной смеси должен составлять 7 см3.
Точно через 4 мин после добавления последнего реактива из
меряют получаемые окраски и величины экстинкции откладывают
на графике по оси ординат, а соответствующие концентрации ви
тамина Д — по оси абсцисс.
В пределах содержания витаминаД от 200 до 1000 ин. ед. в
1см3на графике получается прямая линия.
22.ОпределениевитаминаДв м а с л я н ы хкон
ц е н т р а т а х с омылением
Навеску концентрата, в количестве 0,5—2 г, в зависимости от
содержания витамина Д, взятую на аналитических весах, поме
щают в колбу, снабженную обратным холодильником, и подвер
гают омылению на водяной бане при помощи 10 см3 10 %-ного
спиртового раствора КОН в течение 1 ч при температуре кипения
спирта.
По охлаждении смеси к ней добавляют двойной объем дистил
лированной воды, переносят в делительную воронку, смывают из
колбы небольшими порциями воды и неомыляемую фракцию из
влекают трижды серным эфиром, свободным от перекиси, исполь
зуя первый раз 50 см3, второй и третий раз по 25 см3эфира.
Объединенные эфирные вытяжки тщательно промывают водой
до полного удаления щелочи (проба на лакмусовую бумагу или
фенолфталеин), отделяют водный слой, к эфирному экстракту до
бавляют 5—7 г свежепрокаленного сернокислого натрия и взбал
тыванием колбы с содержимым высушивают вытяжку до полной
прозрачности (в течение 15—20 мин).
Эфирную вытяжку фильтруют через бумажный фильтр;колбу
и фильтр ополаскивают небольшимколичествомэфира, сливая
последний через тот же фильтр, и отгоняют эфир на водяной бане
в токе углекислого газаили азота до получения сухого остатка.
Остаток растворяют в чистом сухом хлороформе в мернойколбе
подходящего объема с таким расчетом,чтобы в 1 см3 раствора
содержалось не менее 200 и не более 1000 ин. ед. витамина Д.
Из полученного раствора отбирают точно 1 см3 в кювету элек
трофотоколориметра или штуфенфотометра,туда же добавляют
3 капли ацетилхлорида и 6 см3 хлороформенногораствора трех
хлористой сурьмы (отношение 1:6) и точночерез4 мин после
добавления последнего реактиваизмеряютинтенсивность обра
зовавшейся окраски с указанным выше светофильтром.
В качестве контроля для установки прибора на нуль использу
ют раствор, состоящий из 1 см3 хлороформа, 6 см3 раствора трех
хлористой сурьмы и 3 капель ацетилхлорида.