ГОСТ Р ИСО 10993.4-99
хсния в медицинской практике, предполагает ускоренный расход этих факторов в процессе абсорбции, коагу
ляции или в процессе других механизмов.
Б.З.? FPA. D-д и м с р. F , ТАТ
Повышение уровня ФГ1Л. D-димсров или Г , является показателем активности механизмов свертыва
ния крови. Увеличение концентрации ТАТ указывает на усиление процесса свертывания крови и формирова
ние комплекса между генерируемым тромбином и циркулирующим антитромбином.
Б.4 Тромбоциты н их функции
Б.4.1 П о д с ч е т т р о м б о ц и т о в
Подсчет тромбоцитов является очень важным из-за их ключевой роли в возможном кровотечении. Зна
чительное снижение количества тромбоцитов в крови, подверженной воздействию изделия, может быть выз
вано процессами объемной и поверхностной агрегации клеток, их депонированием (например, в селезенку) или
коагуляцией крови на материалах или изделиях. Уменьшение количества тромбоцитов во время функцио
нирования имплантируемого изделия может быть вызвано ускоренным разрушением или удалением тромбо
цитов из системы кровообращения.
Б.4.1.1 Подсчет тромбоцитов вручную
В некоторых клинических лабораториях подсчет тромбоцитов проводят вручную, несмотря на доступ
ность приборов для подсчета тромбоцитов, обладающих высокой точностью (Б.4.1.2).
Б.4.1.2 Автоматизированный счет тромбоцитов в це.имой крови и в тромбоцитарной шазме
Автоматизированный подсчет тромбоцитов можно проводить либо в хорошо перемешанной цельной
крови, либо в тромбоцитарной плазме. Использование цельной крови предпочтительнее, так как использова
ние тромбоцитарной плазмы дает менее точные результаты. Автоматизированный подсчет тромбоцитов про
водят на большем количестве клеток, чем при ручном счете. Следовательно, разброс для автоматизированно го
счета может составлять всего 4 %. в то время как наилучший достижимый показатель для ручного счета
составляет II %. Большинство приборов обладает способностью отличать тромбоциты от мелких частиц
небиологического происхождения, что исключает необходимость визуально распознавать и дифференциро
вать осколки тромбоцитов.
Б.4.2 А г р е г а ц и я т р о м б о ц и т о в
Агрегацию тромбоцитов |35| вызывает добавление к тромбоцитарной плазме при постоянном переме
шивании агрегирующих агентов (например. АДФ, эпинсфрин, коллаген, тромбин и др.). По мерс того, как
происходит агрегация тромбоцитов, плазма становится все светлее. Оптическую систему используют для опре
деления изменения трансмиссии света, а регистрирующее устройство графически изображает изменение транс
миссии света, начиная с базовой установки (на «б»). Замедленная или слабая агрегация тромбоцитов может
быть вызвана активацией тромбоцитов и высвобождением содержащихся гранул, увеличением показателя ПДФ
или определенными лекарственными препаратами (например, аспирином, нсстсроиднымн противовоспали
тельными средствами). Важно иметь в виду, что у некоторых животных агрегация тромбоцитов может варьиро
вать или отсутствовать, когда используют отдельные агенты. Спонтанная агрегация тромбоцитов, происходя
щая в отсутствие се индукторов, яатястся патологическим процессом, указывающим на активацию тромбо
цитов.
Б.4.3 А д г е з и в н о с т ь к л е т о к к р о в и
Адгезивность клеток крови |311 — один из показателей совместимости материала с кровью. Чем меньше
адгезированных клеток крови, тем более совместимы поверхность материала и кровь.
Разработаны различные методы измерения адгезивности клеток на поверхности. Большинство этих ме
тодов основаны на следующем наблюдении: определенная часть тромбоцитов удаляется из нормальной цель
ной крови в результате прохождения через колонку со стеклянными шариками в условиях контролируемого
потока и давления. Этот принцип был использован для качественной оценки адгезии других клеток крови на
пшшмеры, которыми покрыты стеклянные шарики. Благодаря использованию этого метода, был сделан вы
вод (311, что адгезия периферических лимфоцитов и полиморфонуклсарных лейкоцитов (PMNs) собак на
стеклянные шарики, покрытые полигидрокснэтилметакрилатом (PHЕМ А) ниже, чем на стеклянные
шари ки, покрытые полистиролом и некоторыми другими полимерами. В этом исследовании использовали
изолиро ванные лнмфоишы и PMNs.
В качестве альтернативного метода хюжно предложить подсчет тромбоцитов, адгезированных на иссле
дуемую поверхность. Вслед за воздействием крови в условиях применении в медицинской практике исследуе
мую поверхность промывают, чтобы удалить нсадггзироважгые клетки, высушивают и готовят к световой или к
сканирующей электронной микроскопии. Подсчитывают число адгезированных тромбоцитов па единицу
площади и отмечают их морфологические особенности (общее число тромбоцитов и чисто агрегатов тромбо
цитов). Можно также использовать тромбоциты, меченые изотопами хрома "Сг и индия "’In.
Б.4.4 С т а н д а р т н о е в р е м я к р о в о т е ч е н и я
Благодаря доступности стерильных одноразовых приспособлений для осуществления надрезов кожи стан
дартной глубины и длины в стандартных условиях значительно повысилась воспроизводимостьданного теста и
его ценность. Увеличение времени кровотечения указывает на снижение функции тромбоцитов или уменьше ние
их числа в крови, последнее можно определить отдельно (Б.4.1). Увеличенное время кровотечения в соче тании с
нормальным числом тромбоцитов наблюдалось при использовании некоторых изделий, конгакти-
15