ГОСТРИСО 7405—2011
} — верхняячасть; 2 — резиновоеуплотнительноекольцо; 3 —средняя часть; 4 — эластомерный лист; 5— вход-выход; 6 —по
кровноестекло; 7—ниэ; в — культуральная среда; 9 —испытуемый материал; 10 —срез дентина, удерживаемый резиновыми
уплотнительными кольцами
Рисунок В.З — Перфузионная камера ADA
В.2.4.5 Планшет-ридер. 96-луночные планшеты, длина волны 540 нм. или любой аналогичный фотометр, с
требуемыми параметрами.
В.2.4.6 Срезы дентина, из дентина человека или рогатого скота.
П р и м е ч а н и е — При применении дентина происхождением не от человека, определяют проницаемость
срезов до использования для подтверждения, что он схож с дентином человека на сопоставимом уровне пульпар-но-
дентииного соприкосновения. Для этих целей применяют капиллярную систему [например. Ftowdec1*].
В.З Процедура испытания
В.3.1 Приготовление клеточной культуры
В.З.1.1 Трехмерные клеточные культуры
Трехмерные клеточные культуры рекомендуется использовать вместе с перфузионной камерой Mlnucells.
Инкубируют полиамидные сетки в 0.1 моль/л уксусной кислоты в течение 30 мин. промывают три раза деминерали
зованной водой, высушивают на воздухе, покрывают фибронектином (0.03 мг/мл) и высушивают на воздухе в сте-
рипьных условиях. Помещают вкладыш клеточной культуры в каждую лунку 6-луночной планшетки вместе с 1.25 мл
культуральной среды. Помещают сетки на вкладыши и засевают 20 мкл клеточной суспензии при 4x10“ клеток/мл.
После 48 ч инкубации при температуре (37 i 2) ‘С и под 5 % СО* при относительной влажности (90 ± 10) % перено сят
сетки а 24-луночные планшетки и инкубируют (14 г 2) сут. Меняют культуральную среду три раза в неделю и пе
реносят сетки в новую 24-луночную планшетку в конце первой недели.
В.З.1.2 Мономерные культуры
Мономерные клеточные культуры рекомендуется использовать вместе с перфузионной камерой ADA. При
меняют методы, описанные в ИСО 10993-5. используя установившуюся клеточную линию, являющуюся общедос
тупной. например из Американской Коллекции Типовых Культур (АТСС).
В.3.2 Приготовление срезов дентина
В.3.2.1 Дентин человека
Выбирают некариозные свежеизвлеченные молярные зубы, удаляют инородные частицы и присоединенные
мягкие ткани ручными инструментами и погружают в 70 %-ный этанол по меньшей мере на 15 мин. Готовят срезы
дентина путем секционирования зубов под прямым углом к их длинным осям через самую широкую часть их голо
вок. под окклюзионной эмалью и над окклюзионными пределами пульповых камер.
В.3.2.2 Дентин животного происхождения (быка)
Выбирают целые зубы, без видимых признаков стираемости. из числа четырех средних нижних резцов убой
ных животных возрастом от 3до 7 лет. Удаляют зубы, очищают от инородных частиц и присоединенных мягких тка
ней ручными инструментами и хранят в 0.5 %-ном хлорамине или других схожих агентах до использования.
Секционируют зубы вдоль их длинных осей как можно ближе к пульповой камере. Для испытания используют срезы
околошеечной части зуба.
" Ftowdec является торговым наименованием изделия, поставляемого DeMarco Engineering. Женева. Швей
цария. Эта информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не является рекламой
означенного изделия со стороны ИСО. Возможно использование эквивалентных продуктов, если доказано, что они
приведут к тем же результатам.
23