ГОСТРИСО 7405—2011
Приложение В
(справочное)
Испытание цитотоксичности дентинного барьера
В.1 Цель
Испытание предназначено для оценки цитотоксичности стоматологических пломбирующих материалов ме
тодом культуры клеток, при котором клетки и материал разделены дентинным барьером, таким образом моделируя
клиническую ситуацию зубной полости, наполненной восстанавливающим материалом.
В.2 Приборы и материалы
В.2.1 Клетки
Установившаяся клеточная линия, являющаяся общедоступной, например изАмериканской Коллекции Типо
вых Культур (АТСС). В качестве варианта могут быть использованы клональные клетки, трансфицированные боль
шим Т-антигеном SV40. например выведенные из зубного сосочка теленка. Их поддерживают в питательной среде в
увлажненной атмосфере при температуре (37 ± 2) *С и 5 % СО*. Также возможно использовать другие установив
шиеся клеточные линии со свойствами, подобными одонтобластам. или другими свойствами, имеющими отноше
ние к физиологии зубных лульпарных тканей.
В.2.2 Культуральная среда
Среда, указанная для выбранной клеточной линии, как приведено в Американской Коллекции Типовых Куль
тур (АТСС) или эквивалент.
П р и м е ч а н и е — Для рекомендаций см. лttpj’/
www.atcc.org
. Питательная среда для клеток, трансфици
рованных большим Т-антигеном SV40. состоит из МЕМа с добавленными 20 %-ной сывороткой зародыша теленка
(FBS). 150 ME пенициллина. 150 мкг/мл стрептомицина. 0,125 мкг/мл амфотерицина Б и 0.1 мг/мл генетицина.
В.2.3 Реагенты
В.2.3.1 3-(4.5-диметилтиазол-2-ил)-2.5-дифенилтетразолий бромид (МТТ).
В.2.3.2 Антибиотики/фунгициды. пенициллин, стрептомицин, амфотерицин Б и генетицин только для кло
нальных клеток, трансфицированных SV40.
В.2.4 Оборудование
В.2.4.1 Вкладыши для планшета для культуры клеток, например MilUcell’1.
В.2.4 2 6-луночные и 24-луночные культуральные планшетки.
В.2.4.3 Полиамидные сетки диаметром 8 мм. например Sefar2’. ширина ячейки 150 мкм.
В.2.4.4 Двухкамерное перфузионнов устройство.
Первое двухкамерное перфузионнов устройство. Minucells1*. (см. рисунок В.1)состоит из перфузионной каме
ры. изготовленной из поликарбоната с основой 40 «40 мм и высотой 35 мм. Пульповая часть устройства соединена
с одной стороны с емкостью с запасом культуральной среды и с другой стороны с перистальтическим насосом и со
судом для отработанной среды. Внутри опытного прибора две камеры разделены срезом дентина, закрепленным в
стальном штативе (см. рисунок В.2).
11МШюеНявляется торговым наименованием изделия, поставляемого Millipore. Билрике. США. Эта информа
ция приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не является рекламой означенного изделия со
стороны ИСО. Возможно использование эквивалентных продуктов, если доказано, что они приведут к тем же ре
зультатам.
*■ Sefar является торговым наименованием изделия, поставляемого Sefar, Вассербург-на-Инне. Германия.
Эта информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта и не является рекламой означен
ного изделия со стороны ИСО. Возможно использование эквивалентных продуктов, если доказано, что они
приве дут к тем же результатам.
Minuceils является торговым наименованием изделия, поставляемого Minucells & Mlnutissue GmbH.
Бад-Аббах. Германия. Эта информация приведенадля удобства пользователей настоящего стандарта и не являет
ся рекламой означенного изделия со стороны ИСО. Возможно использование эквивалентных продуктов, если
дока зано. что они приведут к тем же результатам.
21