ГОСТ Р ИСО 10993-4—2009
начать пункцию вены, особенно важно убедиться, что раствор антисептика, нанесенный на поверхность кожи,
полностью высох и никаких посторонних контактов с кожей не было допущено до момента установки иглы для забо ра
(80).
Для предотвращения осеменения крови микроорганизмами лучше всего подходит забор в контейнер закры
того типа, не содержащий воздуха. Отверстие от иглы, остающееся после прокола изолирующей резиновой пробки
флакона для образцов, должно быть тщательно закрыто, иначе частичный вакуум,создающийся в результате осты
вания образца крови, может привести к втягиванию загрязненного воздуха в контейнер (80).
С.6.5 Выбор источника эритроцитов
В идеальном случае тестирование гемолиза следует проводить с использованием эритроцитов человека.
Однако в ряде случаев такой выбор может быть затруднен или даже невозможен. В некоторых странах источники
крови человека ограничены, и запасы консервированной крови могут быть использованы исключительнодля транс
фузии человеку. Критерии здоровья доноров (человека или животных) также должны быть вопросом, подлежащим
обсуждению. Любая кровь, независимо от источника ее получения, имеет ограниченное время хранения, поэтому
своевременное получение именно крови человека может доставлять определенные трудности. Вслучае использо
вания эритроцитов животного, особое внимание следует уделить получению 100 % контрольного раствора (полнос
тью лизированные клетки), поскольку стабильность мембраны эритроцитов варьирует между различными видами
животных. Отрицательный контрольный образец должен вызывать минимальный гемолиз, чтобы не маскировать
гемолитическую активность исследуемого материала. Эритроциты кролика имеют гемолитические свойства, схо
жие с эритроцитами человека; эритроциты обезьяны — более, а гвинейской свиньи — менее чувствительны, по
сравнению с эритроцитами человека (89).
С.6.6 Определение гемолиза — воздействие на кровь или ее компоненты In vitro, ex vivo и In vivo
Гемолиз может быть зарегистрирован после воздействия на исследуемый материал крови или ее компонен
ты в условиях in vitro, ex vivo и in vivo. Ex vivo и in vivo условия используют при изучении изделий, содержащих
несколько различных материалов.
Допускается ex vivo и in vivo оценка на животных моделях или в процессе клинических испытаний. В первом
случае тестируемое изделие сравнивают с контрольным образцом, обладающим допустимым уровнем гемолити
ческой активности. Во втором случае исследуемый объект оценивают по клинически значимым последствиям гемо
лиза.
Цель ex vivo или ю vivo тестов — охарактеризовать гемолитический потенциал медицинского изделия. Пред
варительные исследования могут проводиться и in vitro с применением как свежей, так и просроченной крови чело
века. а также крови животных. Для медицинских изделий, предназначенных для использования ex vivo,
общепринятым методом является организация рециркуляции крови через изделие в условиях, имитирующих соот
ветствующее клиническое применение. Вдальнейшем некоторые изделия дополнительно изучают моделировани
ем ex vivo на животной модели, а для ограниченного круга изделий — контрольными изучениями на людях.
Размеры медицинского изделия и его назначение влияют на планирование этих исследований
С.6.7 Прямой или непрямой контакт
Предлагаемые условия экстракции описаны в ИСО 10993-12. Некоторые методы предусматривают прямой
контакт изделия с эритроцитами, в то время как в других описано приготовление экстрактов, которые затем приво дят
в контакт с эритроцитами. Выбор метода должен базироваться на назначении изделия и условиях его примене ния.
Граничные условия следует принимать во внимание, если используются повышенные температуры, условия
подготовки экстрактов изложены в ИСО 10993-12.
22