ГОСТ Р ИСО 10993-4—2009
Приложение С
(справочное)
Исслвдованио гемолитических свойств медицинских изделий и их компонентов
С.1 Общие положения
Существует обширная литература, описывающая взаимодействие материал/кровь. Однако существует
лишь несколько достаточно надежных и воспроизводимых методов тестирования, позволяющих предсказать пове
дение исследуемого материала при его клиническом применении. В настоящем приложении приведен обзор
извес тных методов тестирования гемолитической активности и обсуждены факторы, имеющие отношение
к их способности охарактеризовать медицинские и стоматологические изделия.
С.2 Термины и определения
В настоящем приложении применены следующие термины с соответствующими определениями.
С.2.1 антикоагулянт: Агент, предотвращающий или препятствующий коагуляции (62].
Примеры — ГОпарин или цитрат.
С.2.2 онкотическое давление; коллоидное осмотическое давление: Суммарное влияние белков и дру
гих высокомолекулярных компонентов на осмотическое давление плазмы (62].
С.2.3 гематокрит: Отношение объема эритроцитов к общему объему крови (индивидуально для каждого
образца).
С.2.4 гемолиз: Выделение гемоглобина (НЬ) из эритроцитов в результате разрушения или частичного
повреждения при интактной клеточной мембране.
C.2.S отрицательный контрольный образец: Полиэтилен высокой плотности или другой материал с под
твержденными свойствами.
П р и м е ч а н и е — См. ИСО 10993-12.
С.2.6 эритроцитарная масса: Компонент, полученный в результате центрифугирования цельной крови с
последующим удалением супернатанта, состоящего из плазмы.
П р и м е ч а н и е — Свойства эритроцитов человека для трансфузии: объем фракции эритроцитов состав
ляет 0.65 — 0.80 объема цельной крови. Используемый образец содержит все эритроциты, большую часть лейко
цитов (примерно 2.5 — 3.0 х 103клеток/мл) и различное число тромбоцитов (в зависимости от метода центрифуги
рования).
С.2.7 отмытые эритроциты: Суспензия эритроцитов, полученная из цельной крови после удаления плаз
мы и отмывки в физиологическом растворе.
П р и м е ч а н и е — Это эритроцитарная суспензия, из которой удалена большая часть плазмы, лейкоцитов
и тромбоцитов. Число остаточной плазмы определяется протоколом отмывки. Использовать суспензию отмытых
эритроцитов следует как можно быстрее после окончания процедуры отмывки. Хранить не дольше, чем 24 ч при
температуре 1 °С — 6 ‘ С.
С.2.8 цельная кровь: Кровь, полученная от здорового донора, содержащая цитрат или гепарин в качестве
антикоагулянта.
С.З Причины гемолиза
С.3.1 Механические силы — давление
Мембрана эритроцита полупроницаема. Разность давлений возникает, когда такая мембрана разделяет два
раствора с различными концентрациями. Осмотическое давление существует, когда мембрана непроницаема для
пассивного переноса растворителя. Этот перепад давления может вызывать разбухание эритроцитов и разруше
ние клеточной мембраны, сопровождаемое выделением свободного гемоглобина (62).
С.3.2 Механические силы — реология
Факторы, воздействующие на кровь (скорость потока, сдвиговые напряжения и другие силы), способные
деформировать мембрану эритроцитов, могут вызывать разрушение их мембраны.
С.3.3 Биохимические факторы
Изменение структуры мембраны на молекулярном уровне способно изменить прочность и эластичность мем
бран эритроцитов. Недостаток питания или энергии (АТФ) может сопровождаться потерей дискообразной формы и
микровезикуляции (mlcrovesiculation) гемоглобина. Химические агенты, бактериальные токсины. pH и нарушения
метаболизма под воздействием температуры способны подвергать опасности мембраны эритроцитов [63]. Эти
факторы способствуют разрушению мембран эритроцитов при осмотическихдавлениях, существенно меньше ожи
даемых. Может быть выполнен специальный тест, определяющий при каком осмотическом давлении
разрушается мембрана эритроцита (осмотическая хрупкость).
18