ГОСТ Р ИСО 10993-4—2009
С.4 Клиническая значимость гемолиза
С.4.1 Токсический эффект
Повышение уровня свободного гемоглобина а плазме может вызывать токсические эффекты или иницииро
вать процессы, приводящие к поражению почек или других органов (62]. Определение концентрации свободного
гемоглобина плазмы является удобным методом измерения степени повреждения эритроцитов, а также
является косвенным индикатором травмы других форменных компонентов крови.
С.4.2 Тромбоз
Внутрисосудистый гемолиз сопровождается выделением фосфолипидов, способствующих тромбообразо-
ванию (66). Значительное падение числа эритроцитов в крови в результате гемолиза приводит канемии и снижению
способности транспортировать кислород, что имеет соответствующее отрицательное воздействие на мозг и
другие ткани.
C.S Определение критериев отбора для гемолиза
Гемолиз является функцией от времени и свойств материала, таких как поверхностная энергия, морфология
и химия поверхности. Гемолиз зависит также от сдвигового напряжения, взаимодействия материал/клетка. харак
тера слоя адсорбированных белков, стабильности потока, захвата воздуха и особенностей источника крови (67],
(68]. (69). При сравнении гемолитического потенциала материалов и медицинских приборов эти параметры следует
тщательно контролировать. Спектр методов изучения гемолиза чрезвычайно широк: от простейших (in vitro в стати
ке) до высокосложных (In vivo в потоке). Изучение гемолитического потенциала носит не абсолютный, но. скорее,
относительный характер и определяется набором методов и стандартов, принятых в конкретной лаборатории.
Методами in vitro могут быть измерены небольшие уровни гемоглобина плазмы, которые нельзя определить в усло
виях in vivo (например, вследствие связывания гемоглобина плазмы с гаптоглобином и быстрого удаления из кро
ви). В качестве индикаторов In vivo гемолиза может быть применено измерение уровня лактат дегидрогеназы и
гаптоглобина. Невозможно вывести универсальный критерий допустимого уровня гемоглобина, применимого для
оценки любых медицинских изделий. Воздействие изделия на гемолиз может на какое-то время быть замаскирова
но травмой крови при хирургическом вмешательстве. Применение аппарата, провоцирующего гемолиз, может быть
единственным шансом спасения жизни пациента. На практике применение многих аппаратов сопровождается
гемолизом. Следовательно, если изделие провоцирует гемолиз, важно подтвердить, что изделие имеет клиничес
кие преимущества, а значение гемолиза лежит в клинически допустимых пределах. Критерии применимости долж
ны быть обоснованы на основе оценки критериев риска и пользы. Следующие вопросы могут быть предложены
выработки таких критериев:
в) Как долго будет применяться изделие в контакте с пациентом?
b
) Насколько велик гемолиз, индуцированный материалом или изделием?
c) Каково отношение рисков и преимуществ в случае применения других известных аналогичных методов
лечения?
d) Каковы гемолитические свойства этих известных аналогичных методов лечения? Как ведет себя данное
изделие по сравнению с другими методами лечения?
в) Насколько эффективно тестируемое изделие по сравнению сдругими методами лечения? Более эффек
тивное изделие может вызывать более высокий гемолиз, однако дополнительная эффективность может повысить
пользу для пациента.
С.6 Исследование гемолиза — Общие положения
С.6.1 Методы
С.6.1.1 Общие положения
Для оценки повреждения эритроцитов используют тесты In vitro. Прямые методы определяют гемолиз, инду
цированный физическим и химическим контактом с эритроцитами. Непрямые методы определяют гемолиз,
вызванный контактом с экстрактами из исследуемых материалов. Стандарт ASTM F 756-00 (10]описывает тестиро
вание гемолитических свойств материалов (в основном за счет химических факторов), но его недостаточно для тес
тирования медицинских изделий в целом. ASTM F 756-00 (и тесты на гемолиз, перечисленные в GBi’T
16175-1996(11])приаедены в качестве примера и возможной отправной точки при разработке протокола тес
тирования гемолитических свойств конкретного аппарата. Исследование гемолитических свойств отдельных мате-
риалов следует дополнить динамическими тестами аппарата в сборе для определения вклада в гемолиз его
конструкции, специфики использования по назначению и гемодинамических факторов.
В простейшей форме, в случае использования для контакта с тестируемыми материалами сильно разбавлен
ных суспензий эритроцитов, значение гемолиза часто представляют в процентах гемоглобина, выделившегося в
супернатант и нормализованного на общее количество гемоглобина в пробе (за 100 % принимают концентрацию
гемоглобина, выделяющегося в пробу при полном разрушении всех присутствующих в ней эритроцитов). В случае
тестирования медицинских изделий, для которых применение высоко разбавленных суспензий эритроцитов невоз
можно. гематокрит крови и другие факторы должны быть учтены при нормализации индекса гемолиза (63).
Каждая лаборатория, по меньшей мере,должна иметь возможность измерять общую концентрацию гемогло
бина в крови и содержание его в плазме. Концентрация свободного гемоглобина плазмы (в норме от 0 до 10 мг/л)
существенно ниже его общей концентрации в крови (в норме от 11000 до 18000 мг/л). Следовательно, для их опре
деления в процессе тестирования должны быть задействованы разные методы.
19