ГОСТ Р ИСО 10993-4—2009
6.3 Типы тестов
6.3.1 Тесты In vitro
При рассмотрении результатов, полученных в тестах in vitro, учитывают следующие показатели:
гематокрит. антикоагулянты, условия хранения пробы, срок хранения пробы, наличие контакта с возду
хом и уровень pH. температуру, последовательность проведения исследований изучаемого материала
и экспериментального контрольного образца, соотношение площади поверхности и объема, условия
динамикижидкости(особенноскоростькровотокалибо скоростьвымываниястенки). Исследования сле
дует проводить, повозможности, в пределахнеболее4 ч. таккакмногиесвойства крови изменяютсясра
зу же после отбора образца.
6.3.2 Методы exvivo
Методы ex vivo предназначены для изделий, которые предполагают использовать ex vivo, напри
мер изделия, присоединяемые извне. Исследования ex vivo также пригодны для изделий, эксплуатиро
вать которые предполагается in vivo, например, сосудистые протезы. Однако в таком случае,
исследование ex vivoне заменяет имплантацию в качестве теста.
Существуют готовые тест-системы для мониторинга адгезии тромбоцитов, возникновения эмбо
лии, осажденияфибриногена, массытромбов, адгезиилейкоцитов, убылитромбоцитовв крови иактива
ции тромбоцитов [20], [30], [48]. Скорость кровотока измеряют либо прибором с эффектом Допплера,
либо электромагнитным методом. Изменение скорости кровотока может служить индикатором возник
новениятромбов, ихразмеров, местотложения, а также развивающейсяэмболии. Для мониторинга вза
имодействия изделий с кровью ox vivo используют компоненты кровис радиоактивными метками. Чаще
всего метят тромбоциты и фибриноген. Изменение реактивности тромбоцитов при нанесении метки
будетминимизированопри болеетщательномсоблюдениивсехдеталейэтой процедуры [23]. [24], [25].
Преимущества тестов ex vivoпосравнениюстестамиin vitroзаключаются втом. чтопри исследова
ниях ex vivoиспользуют поток нативнойкрови, что исключаетартефакты, вызванныеантикоагулянтами,
и создает физиологические условия кровотока. Ex vivo можно исследовать несколько материалов, так
как появляется возможность менятькамеры, атакже наблюдатьотдельныесобытия в реальном време
ни. Среди недостатков исследований ex vivo — различиескорости кровотока в разныхэкспериментах, у
разных животных, и. как правило, относительно короткие периоды времени для оценки. В связи с этим
рекомендуетсяиспользоватьодно итожеживотноедля положительногоиотрицательного контрольных
образцов.
6.3.3 Методы in vivo
Исследование in vivo предусматривает имплантацию материала или изделия животным. Лоскуты
для реконструирования сосудов, протезы сосудов из биологического материала, кольцевые протезы,
сердечные клапаны — примеры изделий, для исследования которых пригодны методы in vivo. Тесты in
vivoобычно проводятдля изучения гемосовместимости изделий, контактирующихс кровью более24 ч.
В большинстве случаевуспехэкспериментов in vivoопределяется временем свободного кровото
ка. Процентное выражениеокклюзии имассы тромбов определяютпослеудаления изделия. Тенденция
тромбов, образовавшихсянастенкахизделия, кэмболизациидистальныхоргановдолжна бытьизучена
путем макро- имикроскопическихисследованийорганов, лежащихниже потечениюот изделия. Тромбы
чаще всегоскапливаются в почках, попадая туда по кровотоку почечныхартерий от изделий,
импланти рованных выше потечению, на которых ипроисходила эмболизация (например, системы
вспомогатель ного кровообращения, искусственное сердце, протезы аорты) [19].
Существуют методы оценки in vivo, которые не ограничивают продолжительность эксперимента.
Для определения проходимости трансплантата или места образования тромба используют артериог-
рамму. Для наблюденияза осаждением тромбоцитовв различныепериоды временииспользуютрентге
новские снимки. Выживание тромбоцитов и их убыль в крови используют в качестве индикаторов
взаимодействия между кровью и изделием и пассивации вследствие образования неоинтимы или
адсорбции белка.
В некоторых тест-системах in vivoсвойства материала не являются определяющими при взаимо
действии между кровью и изделием. Параметры потока, соответствие, пористость иконструкция транс
плантата могутиметь большее значение, чембиосовместимостьсамогоматериала. Например, системы с
низкойскоростью кровотокамогутдавать результаты исследования, взначительнойстепениотличаю
щиеся от результатов исследования тогоже материалав условиях системы свысокойскоростью крово
тока. В таких случаях результаты, полученные в тест-системе in vivo, должны иметь более важное
значение в сравнении с результатами исследований in vitro.
9