ГОСТ Р 57130—2016
можности провести подходящийанализ гемотоксичности в наиболее подверженной воздействию ткани,
может быть целесообразным в оценке опираться только на исследования in vitro. В некоторых случаях
целесообразнопроведениеоценкигенотоксическихэффектовв участкеконтакта, при том чтоподобные
исследованиядо сих порне получили широкого распространения(примечание 6).
П р и м е ч а н и е 6
Имеется определенный опыт анализов in vivo иикроядерной индукции в коже и толстой кишке (Hayashlet
а!.. 2007). и анализы поломкиДНК в этих тканях также могут быть целесообразным заменителем.
2.4 Определение мутагенов зародышевых клеток
Результаты сравнительных исследований показали, что в количественном отношении больши
нствомутагеновзародышевых клеток могутбытьобнаружены погемотоксичности виспытаниях сомати
ческих клеток, так что отрицательные результаты испытаний генотоксичмости соматических клеток in
vivo в целом указывают на отсутствие эффектов со стороны зародышевых клеток.
3 Рекомендации в отношении тестов in vitro
3.1 Повторение тестов и интерпретация их результатов
Воспроизводимость результатов тестов — важнейший аспект исследований, проводимых с
использованием инновационных методов или неожиданных результатов, однако плановый анализ пре
паратов с использованием стандартных широко применяемых испытаний генотоксичности зачастую не
требует повторного проведения. Данные тесты вдостаточной степени характеризованы и имеютдоста
точный внутреннийконтроль, такчто повторениетестовс определенноположительным или отрицатель
ным результатом анализа, какправило, не требуется. В идеаледолжна быть возможностьуказать, что в
результате проведения теста былидостигнуты определенно отрицательные или определенно положи
тельные результаты. Однако результаты испытаний иногда не удовлетворяют установленным критери
ям положительного или отрицательного результата и, таким образом, их считают «сомнительными».
Применение статистических методов анализа можетулучшить интерпретациюданных, при этом доста
точная биологическая интерпретация имеет критически важное значение. При повторном проведении
теста, в результате которого был достигнут сомнительный результат, может быть достигнут (i) опреде
ленно положительный результат, тогда общий результат будет положительным, (ii) отрицательный
результат, в этом случае результат будет признан невоспроизводимым, а следовательно, и общий
результат испытания будет отрицательным, или (iii) еще один сомнительный результат, при котором
общий результат остается сомнительным.
3.2 Рекомендованный протокол выявления бактериальных мутаций
Рекомендации по протоколу представлены в руководстве OECD (1997) и отчете IWGT (Gatehouse
etal.,1994).
3.2.1 Выбор высоких доз
Максимальные дозы
Максимальная рекомендованная доза составляет 5000 мкг/тарелка (для испытуемых веществ в
жидкой форме), без ограничений, обусловленныхсвойствами растворимости или цитотоксичности.
Предел растворимости
Для бактериальных культур проводят оценку преципитирующих доз при условии, что преципитат
не влияетна обработку, токсичностьне являетсялимитирующей, а максимальная концентрация не пре
вышает 5000мкг/тарелка (или 5 мкл/тарелка — для испытуемых веществ вжидкой форме). Вотсутствие
наблюдаемой цитотоксичности самую низкую преципитирующуюдозу следует использовать в качестве
максимальной. Если отмечается цитотоксичность или мутагенность, независимо от растворимости,
максимальнаядоза должна быть установлена с учетом цитотоксичности, какописано ниже.
Предел цитотоксичности
В тесте Эймса установленные дозы должны показывать признаки значительной токсичности, при
этом не превышая максимальной дозы 5000 мкг/тарелка. Токсичность может быть установлена по сни
жению числа ревертантов и/илиочистка, и/или уменьшение бактериального газона.
3.2.2 Дизайн исследования/протокол тестов
Рекомендованныйнабор бактериальныхштаммов (OECD) включает штаммы, позволяющиеопре
делить замещениеоснования имутации со сдвигом рамкисчитывания следующим образом:
- SalmonellatyphimuriumТА98;
5