ГОСТ Р 57130—2016
5.2.1 Оценка положительных результатов, полученных в рамках анализа
бактериальной мутации In vitro
Поскольку положительные результаты теста Эймса указывают на химическую активность ДНК,
обширные пострегистрационные испытания с целью оценки мутагенного и канцерогенного потенциала
in vitro необходимыдля оценки потенциального риска при терапии пациентов, за исключением случаев,
когда этообосновано соответствующим анализом оценки рискаУпользы.
Имеются некоторые хорошо изученные примеры артефактного роста колоний, не являющихся
истинно ревертантными. Они могут быть обусловлены контаминацией аминокислотами (т. е. представ
лением гистидинадля штаммов Salmonella typhimurium или триптофаном для штаммовEscherichia coli),
следовательно, анализ бактериальной реверсии не подходит для пептида, который может подлежать
распаду. В некоторых случаях положительные результаты анализов бактериальной мутации могут не
указывать на наличие генотоксического потенциала in vivo у человека, например в случае специфичес
кого бактериального метаболизма, например активация бактериальными нитроредуктазами.
5.2.2 Оценка положительных результатов анализов на клетках млекопитающих in vitro
Рекомендации пооценкесовокупностиданных и пострегистрационныхиспытаниях при получении
положительных результатов анализа генотоксичности обсуждаются в отчетах IWGT (например,
Thybaudetal.. 2007). Кроме того, в научной литературе представлен рядусловий, которые могутпривес
ти к положительному результату анализа in vitro сомнительной значимости. Следовательно, любой
положительный результат анализов in vitroследует оценивать с учетом совокупностиданных, перечис
ленных ниже. Дан неполный список, однакоон позволяетпринять решение.
i. Данные условия не проявляются in vivo(pH: осмоляльность, преципитат).
(Следуетучесть, что предельное значение 1мМ позволяетизбежатьувеличения осмоляльностии
если исследуемое вещество изменяет уровень pH. желательно скорректировать pH до нормального
уровня pH внеобработанныхкультурахв период терапии).
и. Эффектразвивается только при наиболее токсичныхконцентрациях.
При анализе MLA ростна
2
80 % приводиткснижению RTG.
В цитогенетических исследованиях in vitroпри подавлении роста на
2
50 %.
В случае удовлетворенияодному из вышеуказанныхусловий, если существующиеданные свиде
тельствуют об отсутствии генотоксического потенциала, можно придерживаться стандартной батареи
тестов (вариант 1). Таким образом, однократного испытания in vivoбудетдостаточно.
5.2.3 Оценка отрицательныхрезультатов in vitro
Для отрицательных результатов анализов in vitro в особых случаях следует рассмотреть возмож
ность проведения дополнительных анализов (приведен неполный список, примеры даны лишь для
помощи при принятии решений). Структура вещества или известные свойства метаболизма указывают
на то. что стандартная технология метаболической активации in vitro (например, печень грызунов S9)
может быть недостаточной, структура либо подтвержденныесвойства активности вещества указывают
на возможную целесообразность использования иных методов/систем.
5.3 Оценка результатов, полученных в испытаниях in vivo
Испытания in vivoимеютпреимуществоанализа всасывания, распределения ивыведения, не учи
тываемых в испытаниях in vitro, но потенциально актуальны и при применении у человека. Кроме того,
характеристики метаболизмаболее актуальныin vivo, посравнению ссистемами, обычно используемы
ми in vitro. Если результаты анализов in vivo и in vitro не согласуются между собой, различие можно
учесть/обьяснить в индивидуальном порядке (имеется в виду различив метаболизма, быстрого и
эффективного выведения вещества in vivo).
Анализы генотоксичности in vivo также потенциально могут дать ложноположительные результа
ты, не свидетельствующие об истинной генотоксичности. Например:
i. Микроядерный рост может возникнуть без введения генотоксического вещества в связи с нару
шением эритропоэза (Tweats etal., 2007,1).
ii. Данные об аддукции ДНКследует интерпретировать в свете известного фонового уровня эндо
генных аддуктов.
ii. Непрямыеэффекты, связанныестоксичностью, могут повлиятьна результатыанализов разры
ва нитейДНК (например, методом щелочнойэлюции или кометного анализа).
Таким образом, при оценкеданных генотоксичности важноучесть всетоксикологические игемато
логические результаты (примечание 15). Непрямыеэффекты, связанныестоксикологическими измене
ниями, могутиметь резерв безопасности и неявляться клинически значимыми.
14