ГОСТ Р 57130—2016
повреждениями. Имеются сведения о том, что при помощи MLA также возможно выявить утрату
хромосом.
Существуют некоторые дополнительные анализы in vivo, которые можно использовать в рамках
батареи тестов или в качестве дополнительных тестов для получения необходимого объема доказа
тельствпри оценке результатованализов in vitro* in vivo(см. ниже).Отрицательныхрезультатов соотве
тствующих анализов in vivo {обычно двух) с достаточным обоснованием конечных точек и
демонстрацией концентраций (см. раздел 4.4) обычно оказывается достаточно для подтверждения
отсутствия существенного риска генотоксичности.
2.2 Описание двух вариантов стандартного набора тестов
Следующиедва варианта стандартной батареи тестов считаются в равнойстепени приемлемыми
(примечание 4):
Вариант 1
i. Испытание генных мутацийв бактериях.
ii. Цитогенетический тестхромосомных повреждений (анализ хромосомныхаберраций в метафа
зеin vitroили микроядерная проба in vitro)либо анализ генных мутаций Ткв лимфоме мышей in vitro.
iii. Тестгенотоксичностиin vivo,обычно тестна хромосомные поломки нагемопоэтическихклетках
мышей в виделибо микроядерной пробы, либо анализа на хромосомные аберрации в метафазе.
Вариант2
i. Испытание генных мутаций вбактериях.
ii. Оценка генотоксичности in vivoдвух разных тканей, обычно микроядерная проба с использова
ниемгемопоэтическихклетокгрызуновивторойанализin vivo. Какправило, используетсяанализполом
ки нитейДНК в печени, если не указаноиного (см. ниже, раздел 2и примечание 12).
П р и м е ч а н и е 4
Несмотря на возможность использования обоих вариантов батареи тестов, конкретные данные об инди
видуальном испытуемом веществе могут свидетельствовать о предпочтительности одного из вариантов.
Например, если системные концентрации в моделях животных равны либо менее ожидаемой клинической кон
центрации. могут использоваться анализы in vitro. вариант 1 (см. также разделы 2.3.4 и 4.4.1).С другой сторо ны.
вариант 2. включая испытания в печени, рекомендован в случаях, когда предполагается, что в печени
генерируются короткоживущие реактивные метаболиты.
Исторически опыт выбора варианта 1 шире, отчасти потому, что он основан на версии S2A и В.
Однако аргументами в пользу взаимозаменяемости вариантов 1и 2 включают: при получении положи
тельного результатаанализа на клеткахмлекопитающихin vitro,четкиеотрицательныерезультаты двух
проведенных анализов in vivo в соответствующих тканях при подтвержденной достаточной концентра
ции считаются достаточными для подтверждения отсутствия генотоксического потенциала in vivo
(см. пункт 5.4.1.1). Таким образом, стратегия проведения анализа, при которой проводятсядва анализа in
vivo, аналогичнастратегии контроля положительного результата in vitro(примечание 4).
При проведении испытаний в разных вариантах может использоваться дизайн исследований in
vivoострой или хронической токсичности. При многократном введении предпринимались попытки вклю
чить конечные точки генотоксичности в исследования токсичности, с учетом научной обоснованности.
При оценке in vivo нескольких конечных точек предпочтительнее включать их в одно исследование.
Зачастую имеется достаточно информации о вероятной пригодности доз в рамках исследования дли
тельной токсичности до начала исследования, позволяющих определить целесообразность
проведения остроготеста или комплексного испытания.
В случае полученияотрицательныхрезультатов использованиеодного извариантовстандартной
батареи тестов, проводимых и оцениваемых в соответствии с текущими рекомендациями, обеспечит
достаточные доказательства отсутствия генотоксической активности и в этом случае дополнительных
тестов не требуется. В случае получения положительных результатов стандартной батареи тестов в
зависимости от их терапевтической пользы, вещество подлежит более тщательному исследованию
(см. раздел 5).
Несколько анализов in vivo могутбыть использованы вовторой части оценки in vivo в рамках вари
анта 2 (см. раздел 4.2), некоторые из которых могут быть интегрированы в исследования токсичности
многократных доз. Предпочтительной тканью является печень, благодаря характеристикам достигае
мых концентраций и метаболизма, но выбор ткани для анализов in vivo и видов анализов должен быть
основан на понимании потенциального механизма метаболизма in vivo или тканей, подверженных
воздействию.
Информацию о числовых изменениях можно получить в результате анализов на клетках млекопи
тающих in vitro и микроядерных проб in vitro или in vivo. Элементы стандартных протоколов, способные
3