ГОСТ Р 57130—2016
4.3Выбор доз в рамках анализа in vivo
Обычно анализ проводятс использованием трех уровнейдоз (Hayashi et al., 2005).
4.3.1 Краткосрочные исследования
Длякраткосрочныхисследований(1—3 дозы)максимальнорекомендованнаядозадля исследова
ний генотоксичности представляет собой предельную дозу 2000 мг/кг при условии хорошей переноси
мости либо максимально переносимую дозу, определяемую (например, для микроядерного анализа
(OECD)) какдозу, вызывающую признаки токсичности такой степени выраженности, чтобы более высо
кие дозы при сохранении аналогичного режима дозирования привели бы к летальному исходу.
Аналогичные рекомендациидействуют в отношении кометного анализа (Hartmann et al., 2003) и
транс генногоанализа мутаций(Heddleetal., 2000).Подавлениепродукцииэритроцитовкостны
ммозгомтакже следует учитывать при выборе дозы. Интервалы между более низкими дозами, как
правило, в два-три раза ниже заданного.
4.3.2 Исследования многократного применения
Вариант 1набора
В случае если анализ генотоксичности in vivo интегрирован в токсикологическое исследование
многократногоприменения, дозы, какправило. считаются подходящими, еслитоксикологическое иссле
дование отвечает критериям исследования, подкрепляющего клинические исследования с участием
человека, чтоможетотличатьсяоткритериеввыборадозы вруководствеOECDпри проведениимикроя-
дерной пробы in vivo. Это относится и кслучаям отрицательных результатов анализа на клетках млеко
питающих in vitro («несвойственно положительный», см. раздел 5).
Пострегистрационные исследования или набор тестов поварианту 2
При проведении пострегистрационных исследований с целью проверки любого из показаний по
генотоксичности или при использовании 2-го варианта без проведения анализа на клетках млекопитаю
щих in vitro следует учитывать несколько факторовдля определения целесообразности максимальной
дозы для оценки генотоксичности. Любого из нижеприведенных критериев достаточно для того, чтобы
подтвердить, что максимальная доза в токсикологическом исследовании (обычно на крысах) подходит
для микроядерной пробы идлядругих оценокгенотоксичности:
i. Максимально допустимая доза (МПД) на основании физико-химических свойств препарата в
основе (при условии, что МПД для данной основы аналогична МПД, достигаемой при остром введении;
примечание 13).
ii. Предельная доза 1000 мг/кг для исследований продолжительностью 14 дней и больше, при
условииудовлетворительной переносимости.
iii. Максимальновозможная концентрациядостигается за счетдостижения плато/насыщения кон
центрации либо за счет накопления вещества. Напротив, при существенном снижении концентрации
исходного препарата с течением времени (например, г 50 % снижение от начальной концентрации)
исследование можетбытьдисквалифицировано (за исключениемслучаев, когдадоступенобразец кро
ви, взятый в первые несколько дней). Если данный эффект наблюдается у животных одного пола, как
правило, у животных с меньшей концентрацией не будет проводиться оценки в конце исследования, за
исключением случаев повышения концентрации интересующего метаболита.
iv. Максимальнаядоза составляет 50 % от максимальнойдозы, используемойв экспериментахпо
однократному приему, т. е. приближена к минимальной летальнойдозе, если подобные острыеданные
доступны по какой-либо иной причине (максимальная доза для микроядерных проб при однократном
приеме, описанных в руководстве OEDC в качестве дозы, выше которой можно ожидать летальности),
аналогичные рекомендации предоставляют и для других анализов in vivo (например, Hartmann et al.,
2003).
Выбормаксимальнойдозы наоснованиитолько коэффициентаконцентрации(многократноеикли
ническое воздействие) без признаков токсичности не являетсядостаточно обоснованным.
П р и м е ч а н и е ^
Это. как правило, актуально для распространенных основ, таких как водный раствор метилцелтолозы.
но для таких основ, как Твин 80. вводимый объем может быть в 30 раз ниже, чем в острых экспериментах.
4.3.3 Испытуемыепрепараты, оказывающие токсическое действиена кровь икостный
мозг
Многиевещества, индуцирующиеанеуплоидию, такиекакмощныеверетенныеяды,определимы в
микроядерных пробах костного мозга или крови in vivo только в узком диапазоне доз, приближенных к
токсическим. Это справедливо и для некоторых кластогенов. В случае, если токсикологические данные
свидетельствуют о тяжелой токсичности в отношении эритроцитов (например, выраженная супрессия
ю