ГОСТ Р 57130—2016
П р и м е ч а н и е 16
Положительный контроль для краткосрочных исследований генстоксичности или исследований повтор
ных доз:
Для микроядерных (и других цитогенетических) анализов цель положительного контроля заключается в
подтверждении того, чтобы лица, проводящие оценку слайдов, могли свысокойстепенью надежности выявить
микроядврный рост. Это достижимо за счет использования образцов периодических исследований (через каж
дые несколько месяцев) малых групп животных (одного попа), получающих острую терапию с положительным
контролем. При ручной оценке такие слайды могут быть включены в кодированные слайды, оценивавшиеся для
каждого исследования. Положительные контрольные слайды не должны быть очевидными для аналитиков на
основании свойств окрашивания либо частоты микроядер. В случае автоматической оценки для каждого анали за
должны использоваться соответствующие образцы для контроля качества.
Для других генотоксических анализов In vivo цель положительного контроля заключается в подтвержде
нии надежного определения нарастания поломокДНК/мутагенности при помощи анализа на выбранном биоло
гическом виде, ткани и в рамках выбранного протокола. После того, как лаборатория показала способность
непрерывно выявлять соответствующие положительные контрольные вещества в множестве независимых
экспериментов, периодическое выполнение положительных контрольных экспериментов в целом является
достаточным при условии неизменности условий эксперимента. Однако в настоящее время наличие одновре
менного положительного контроля для кометного анализа крайне желательно.
5 Рекомендации по оценке результатов испытаний истратегий контрольных
испытаний
Сравнительные исследования убедительно показали, что каждая тест-система in vitro позволяет
достичь ложноотрицательных и ложноположительных результатов в отношении характеристик канце-
рогенностиу грызунов. Батареитестовгенотоксичности(in vitroиinvivo) позволяютопределитьканцеро
гены. механизм которых обусловлен непосредственно генетическими поломками, как в случае
большинства известных канцерогенов человека. Следовательно, эти батареи тестов неспособны выя
вить канцерогены, необладающие генотоксическимисвойствами. Условия проведенияэкспериментов,
например вследствие ограниченной мощности систем активации метаболизма in vitro, могут привести к
ложноотрицательным результатам. Применение батареитестовнаправлено наснижение риска получе
ния ложноотрицательных результатовдля веществ с генотоксическим потенциалом. Сдругой стороны,
положительный результат анализа генотоксичности не всегда означает, что данное вещество
представляетсобойопасностьдля человека с точки зрения генотоксичности/канцерогеиности.
Несмотря нато.чтоположительныеданные in vitroмогутуказыватьна подлинные генотоксические
свойства препарата, соответствующие данные in vivo в большинстве случаев позволяют установить
биологическую значимость результатов, полученных in vitro. Кроме того, в связи с существованием
нескольких непрямых механизмов генотоксичности. развивающихся лишь при небольшом повышении
концентраций, возможноопределитьбезопасныйуровень (порог)для классов препаратовспризнаками
подобныхмеханизмов(см. пункт5.2ниже. Mullerand Kasper. 2000; Scottetal.. 1991; Thybaudetal..2007).
5.1 Оценка биологической актуальности
Нижеизложенные рекомендации предполагают, что испытание проводилось с необходимым
интервалом междудозами, уровнем токсичности ит. д.
Небольшойростявной генотоксичностиin vitroили in vivoследуетоцениватьсточкизрения воспро
изводимости и биологической значимости. Примеры результатов, не имеющих биологической значи
мости. включают:
i.
Небольшой статистически значимый рост, по сравнению с отрицательным контролем или рас
творителем, но не выходящий за рамки доверительных интервалов соответствующего исторического
контролядляданного испытательного центра.
ii.
Слабый/сомнительный невоспроизводимыйответ.
При условии удовлетворения одному из вышеназванных условий, есть основания предполагать
отсутствие генотоксического потенциала, результаты испытания считают отрицательными и не имею
щими биологической актуальности, при этом дальнейшиханализов проводить не требуется.
5.2 Оценка результатов, полученных в испытаниях in vitro
При оценке положительных результатов испытания бактериальной мутагенности следует учиты
ватьчистоту испытуемого вещества с целью определения обусловленности положительногорезульта
та контаминантом.
13