ГОСТ Р 55992.2—2014
г) Ожидаемые результаты
Концентрация 17а-гидроксилрогестерона о «сухих пятнах» крови здоровых новорожденных зави
сит от демографических вариаций, возраста, веса, недоношенности, рождения двойни и более плодов.
В соответствии с Рекомендациями рабочей группы по неонатальному скринингу Европейского общес
тва педиатрической эндокринологии концентрация для доношенных новорожденных на 3-й — 5-й день
жизни 30 нмоль/л принимается как пороговое значение; 30—90 нмоль/л указывают на необходимость
наблюдения за новорожденным и уровнем 17а-гидроксипрогестерона: значение свыше 90 нмоль/л ука
зывает с высокой степенью вероятности на врожденную гиперплазию коры надпочечников и адреноге-
нитальный синдром [12].
У недоношенных новорожденных значения 17а-гидроксипрогестероиа выше, значения более
100 нмоль/л могут свидетельствовать о врожденной гиперплазии надпочечников [18].
д) Пороговое значение (cut-off)
Для доношенных новорожденных на 3—5 день жизни концентрация 30 нмоль/л принимается как
пороговое значение [18]. У недоношенных новорожденных со сроком гестации 33—36 недель и массой
менее 2000 г пороговый уровень равен 60 нмоль/л [12].
Приведенные в инструкции к набору реагентов значения могут служить ориентирами. Каждой ла
боратории при использовании набора рекомендуется уточнитьпороговое значение (cut-off), которое мо
жет незначительно отличаться в конкретном регионе.
е) Интерференция
Должно бытьдоказано отсутствие значимой перекрестной реактивности иммунофлюоресцентно-
го метода измерения 17«-гидроксипрогестерона набором реагентов с другими соединениями стероид
ной структуры, которые могут искажать результаты анализа. Эти данные должны быть указаны в
инструкции к набору.
5.3.4 Набор реагентов для измерения концентрации иммунореактивного трипсина (ИРТ) имму-
нофлюоресцентным методом с временным разрешением на основе лантанидной метки (Ей) для прове
дения неонатального скрининга на муковисцидоз
5.3.4.1 Предназначенное применение набора
Набор реагентов должен быть предназначен для измерения концентрации иммунореактивного
трипсина (ИРТ) в образцах крови новорожденных в виде «сухих пятен» на тест-бланках фильтроваль
ной бумаги с целью выявления новорожденных с высоким уровнем ИРТ при неонатальном скрининге на
муковисцидоз (кистозный фиброз).
5.3.4.2 Принцип метода
Определение основано на твердофазном двусайтовом иммунофлюорометричесхом прямом сэн
двич-методе. в котором используются антитела против двух различных антигенныхдетерминант на мо
лекуле ИРТ. Молекулы ИРТ. содержащегося в калибраторах, контрольных материалах и тестируемых
образцах, связываются с меченными европием антителами и антителами, направленными против дру
гих специфических антигенных сайтов на молекулах ИРТ, иммобилизованных на лунках стрипов
микротитровальных планшетов.
Раствор, усиливающий флюоресценцию хелатов ионов европия, диссоциирует ионы европия из
связанных с меченными им антителами против ИРТ в раствор, где образуются высокофлюоресцентные
хелатные комплексы. Интенсивность их флюоресценции с временным разрешением измеряется в
96-луночных прозрачных планшетах (стрипах).
5.3.4.3 Спектрально-люминесцентные характеристики
Интенсивность флюоресценции ионов европия в составе хелатирующих бета-дикетонатных ком
плексов раствора, усиливающего флюоресценцию, должна регистрироваться в режиме флюоресценции с
временным разрешением. Максимальная длина волны возбуждающего света 340 нм. максимальная
длина волны испускания 615 нм.
Интенсивность флюоресценции увеличивается прямо пропорционально с увеличением концен
трации ИРТ.
5.3.4.4 Первичные образцы для анализа
Непосредственное определение проводится в дисках диаметром 3.2 мм. которые выбиваются с
помощью специального устройства — инструмента для выбивания дисков из «сухих пятен» крови ново
рожденных на тест-бланках фильтровальной бумаги марки Whatman 903 или с аналогичными свойства
ми. См. п 4.4 ГОСТ Р 55992.1.
5.3.4.5 Количество определений с помощью 1 набора
Один набор должен быть рассчитан на 960 определений.
17