ГОСТ Р 55992.2—2014
5.3.2.2 Принцип метода
Свободная галактоза из «сухого пятна» крови и галактоза галактозо-1-фосфата крови, освобожда
ющаяся поддействием щелочной фосфатазы, подвергаются окислению поддействием галактозоокси-
дазы с образованием D-галакто-гексадиальдозы и перекиси водорода.
Определение основано на измерении интенсивности флюоресценции флюорофора — димера
3-(р-гидроксифенил)пропионовой кислоты (димер-НРРА). образующегося из 3-(р-гидроксифенил)пропи-
оновой кислоты (мономер) в реакции с перекисью водорода в присутствии пероксидаэы.
П р и м е ч а н и е — Независимо от принципа ферментативного определения галактозы наборы реагентов
должны быть совместимы с комплектом оборудования лаборатории, для которой осуществляется их закупка.
5.3.2.3 Спектрально-люминесцентные характеристики
Измерение интенсивности флюоресценции в планшетах проводится на планшетном анализаторе
флюорометрическом (флюорометре).Максимум длины волны возбуждения в диапазоне 320—340 нм и
длины волны испускания флюресценции — 405 нм.
5.3.2.4 Первичные образцы для анализа
Непосредственное определение проводится в дисках диаметром 3.2 мм. которые выбиваются с
помощью специального устройства (устройства для выбивания дисков, пробойника, см. п. 4.4, 55992.1)
из «сухих пятен» крови новорожденных на тест-бланках фильтровальной бумаги марки Whatman 903
или бумаги с аналогичными свойствами.
5.3.2.5 Количество определений
Один набор должен быть рассчитан на 960 определений.
5.3.2.6 Компоненты набора
В состав каждого набора должны входить:
- калибраторы с аттестованными значениями концентрации галактозы; не менее 6 уровней кон
центрации. Они представляют собой высушенные пятна крови на фильтровальной бумаге с аналогич
ными свойствами той же марки, на которой выполняются исследования «сухих пятен» крови
новорожденных (не менее 3 пятен крови для каждой концентрации) в запечатанных пакетах с влагопог
лотителем. Концентрация галактозы в калибровочных пробах в диапазоне от 0 до 2220 мкмоль/л (0
— 40.0 мг/100 мл). Калибровочная кривая должна быть построена для каждого планшета.
П р и м е ч а н и я
1 Значения концентрации галактозы, количество калибраторов, срок годности и условия хранения должны
быть указаны в инструкции к набору. Точные значения концентрации галактозы должны быть указаны е контроль
ном сертификате (сертификате качества), прилагаемом к набору, и на этикетках на калибраторах.
2 Изготовитель должен представить информацию о методах аттестации значений концентрации галактозы в
калибровочных материалах.
3 Измерения калибровочных образцов должны проводиться с каждой серией образцов пациентов. Калибро
вочные пробы каждой концентрации измеряются в дубликатах:
- контрольные материалы должны включать галактозу не менее чем на 2 уровнях концентрации (в
диапазоне нормальных и повышенных значений). Они должны содержаться в закрытом пластиковом
конверте с влагопоглотителем и представлять собой высушенные пятна крови на фильтровальной бу
маге той же марки, на которой выполняются исследования «сухих пятен» крови новорожденных.
П р и м е ч а н и я
1 Значения концентрации галактозы в контрольных материалах правильности, количество контрольных ма
териалов. срок годности и условия хранения их должны быть указаны в инструкции к набору. Точные значения кон
центрации галактозы должны быть указаны в контрольном сертификате (сертификате качества), прилагаемом к
набору, и на этикетках на контрольных материалах.
2 Измерения контрольных образцов проводятся с каждой серией измерения образцов пациентов — по 2 об
разца с каждой концентрацией на планшет.
3 Изготовитель должен представить информацию о методах аттестации значений в контрольных материа
лах правильности.
4 Информация о методах аттестации значений концентрации галактозы в контрольных материалах правиль
ности должна быть представлена в инструкции к набору реагентов в сертификате качества или паспорте к кон
трольным материалам.
5 Информация о прослеживаемости значений результатов измерения концентрации галактозы в калибро
вочных и контрольных материалах правильности должна быть представлена в инструкции к набору реактивов. См. о.
4.2.5 настоящего стандарта.
13