ro c n s o rrs 22117-2013
патогенности заключается в предотвращении заболевания, а также в выявлении патогенных
микроорганизмов в очень малых концентрациях, пока они не достигли более высокого уровня.
Дляколичественныхметодов(методовподсчета)целеваяконцентрациядолжна
соответствовать концентрациям, выявляемым повседневно, и любые установленные законом
спецификации должны применяться к используемым матрицам образцов. Целевая концентрация
может использоваться близко к пределу применения количественных методов, чтобы проверить
результативность участников в применяемом диапазоне метода. Однако не следует применять
образцы, концентрация микроорганизмов в которых так низка, что при использовании рутинных
разведений ожидаемое среднее количество организмов в образце будет меньше 10 колоний на
чашку.
Для качественных методов (методов выявления) обычно достаточно присутствия целевых
микроорганизмов в низких концентрациях, чтобы обеспечить действительное заражение в данной
методологии и получить для валидации, чтобы установить или проверить пределы обнаружения для
отдельных лабораторий-участниц.
5.2 Источники, характеристики и прослеживаемость микроорганизмов
Характеристики целевых микроорганизмов устанавливают перед их использованием, чтобы
надежно оценить результативность, особенно в программах, где всем участникам разрешается
использовать различные методологии.
Как типичные, так и атипичные штаммы следует рассмотреть и включить в программу
контроля результативности лаборатории.
Признанные контрольные штаммы, полученные из международных банков, следует
использовать там. где они наиболее всего подходят для цели программы; однако, для более близкого
отражения повседневных ситуаций используют полученные в лаборатории изоляты или «дикие»
штаммы, выделенные из матриц, используемых в программах проверки квалификации лабораторий.
Там, где они применяются, они должны быть проверены в соответствии со стандартными методами
соответствующего международного стандарта, чтобы обеспечить для организаторов проверки всех
атипичных реакций до применения таких штаммов.
В любом случае микроорганизмы,используемые в образцах программпроверки
квалификации, должны прослеживаться до соответствующего фонда культур или до достоверных
данных, имеющихся у организаторов.
В определенных обстоятельствах невозможно использовать контрольные культуры или
стандартные образцы (референтные материалы) из признанных на международном уровне банков
или выращенных в лаборатории штаммов, например, для программ проверки квалификации в
отношении некультивируемых организмов, таких как норовирусы человека. В таких обстоятельствах
клинический материал можно использовать для искусственного заражения испытуемой матрицы, при
погружении, распылении, в случае двустворчатого моллюска, или посредством бионакопления. Метод
искусственного заражения должен быть максимально приближен к «естественному» пути заражения.
Особое внимание необходимо уделить при работе с клиническим материалом человека, пробами
фекальных или рвотных масс, которые необходимо обеспечить защитой от сторонних патогенных
организмов перед использованием. Целевые вирусы должны быть полностью описаны с точки зрения
концентрации штамма с помощью стандартной цепной полимеразной реакции с последующим
секвенированием.
5.3 Фоновая флора
Общая флора образцов, искусственно привнесенная или полученная естественным образом,
должна быть выбрана для оценки способности участников обнаружить н/или подсчитать целевые
микроорганизмы в присутствии нецелевой флоры (типичной для матрицы образца) и презумптивных
целевых микроорганизмов, которые, без соответствующих подтверждений, могут привести к ложным
положительным результатам.
Любые штаммы, используемые для имитации фоновой флоры, должны соответствовать
требованиям 5.2 в отношении описания и прослеживаемости. В образцах, зараженных естественным
образом, влияние фоновой флоры на целевые микроорганизмы необходимо определить.
5.4 Выбор матрицы и матричные эффекты
Все матрицы необходимо оценить, прежде чем использовать их для проверки на какое-либо
влияние на целевые микроорганизмы и фоновую флору, например, когда матрицы уменьшают
восстановление введенных микроорганизмов.
Участники должны быть внимательны к природе матрицы пищевого продукта, если известно,
что такие матрицы неблагоприятно влияют на восстановление микроорганизмов (например, те,
которые связывают и удерживают клетки, например, жирные материалы) или обладают
4