ГОСТ ISO 10993-7— 2011
Готовят ряд разбавленных растворов, смешивая аликвоты контрольного раствора с подходящим объемом
растворителя. Если, например, точно 100 мг ЭО было добавлено к 100 мл растворителя, конечная концентрация
будет составлять 1 мг/мл. Разбавляя 1 мл этого раствора до 10 мл. получают контрольный раствор с содержанием
ЭО 100 мкп’мл. Таким же способом готовят контрольные растворы с более высокой и более низкой концентра цией
ЭО. Готовят контрольные растворы таким образом, чтобы они охватывали всю область ожидаемых коли честв
ЭО в анализируемом образце. Вводят от 1 до 5 мкл аликвот каждого контрольного раствора в колонку
хроматографа для получения значения площади или высоты пика. Определение повторяют дважды.
Для повышения точности объем вводимой пробы должен составлять не менее 10 % объема шприца.
В.1.3 Приготовление контрольных растворов ЭХГ
Взвешивают мерную колбу объемом 100 мл. содержащую 60 мл воды, с погрешностью 0.1 мг. По каплям
добавляют ЭХГ (около 100 мг). Вновь взвешивают колбу. Если контрольные растворы хранят в течение некоторого
времени, определяют разницу в массах: затем доводят объем до метки водой и перемешивают. Если контрольные
растворы используют не сразу, их хранят в холодильнике (см. приложение Е). После 14 сут хранения контрольные
растворы подлежат уничтожению.
Доводят контрольные растворы ЭХГ до комнатной температуры. Готовят, как минимум, три рабочих раство
ра различной концентрации. До использования контрольных растворов для построения калибровочного графика
проверяют линейность параметров хроматографического пика в этих областях концентраций. Готовят контрольные
растворы таким образом, чтобы они охватывали всю область ожидаемых содержаний ЭХГ в анализируемом
образце. Для определения значения площади или высоты пика вводят аликвоты каждого контрольного
раствора от 1 до 5 тлел в колонку хроматографа. Определение повторяют дважды.
В.2 Точность методов
В.2.1 Методы определения ЭО
Межлабораторная оценка ряда методов определения ЭО. изложенных в приложении В. [66}—[68). была
проведена с использованием серий образцов, содержащих ЭО от 40 до к 350 мг/кг. Вычисленный общий коэффи
циент вариации изложенных методов представлен в таблице В.1.
Т а б л и ц а В.1 — Сравнение коэффициентов вариации при внутри- и межлабораторном изучении методов
Определение ЭО
Межпабораюрнде изучение. V>
Вмутрилабораторпос изучение %
Метод равновесного пара
3.7
21,3
Метод с использованием ацетона
4,1
16,3
Метод с использованием DMF
2.9
8.3
Метод с использованием воды
2.7
17.0
При другом межлабораторном изучении проведена оценка метода определения ЭО. изложенного в В.5.6,
[51]. Данные линейной регрессии были получены при сравнении результатов двух лабораторий для серий образ
цов. содержащих ЭО от 3.6 до 26 мг/кг. Рассчитанное уравнение регрессии у = 0.04 + 0.904 х: коэффициент корре
ляции (г) — 0.974 (р < 0.00001). Рассчитанный коэффициент вариации метода при межпабораторном
изучении составлял 4.0 % при содержании ЭО в анализируемой матрице 14 мг/кг или 8.3 % при содержании
ЭО 30 мг/кг (неопубликованные данные, представленные A. Nakamura, Н. Kikuchi и К. Tsuji).
В двух лабораториях были получены данные анализа образцов с тремя различными содержаниями ЭО с
использованием как метода экстракции растворителем с последующим анализом равновесной паровой фазы,
изложенного в В.5.4. [81]. так и метода бромирования. изложенного в В.5.6, [51]. Результаты сравнивали, исполь зуя
линейный регрессионный анализ. Были получены следующие характеристики регрессии: у = -0,03 + 1.07 х.
коэффициент корреляции г = 0.999. При межлабораторном изучении методики, представленной в В.5.4. коэффи
циент вариации составлял 4.7 %; 1.8 % и 2.7 % при содержании ЭО в анализируемой матрице 12. 25 и 56 мг/кг
соответственно. [77].
В.2.2 Методы определения ЭХГ
Межлабораторную оценку проводили с использованием метода определения ЭХГ. изложенного в В.5.7. [9].
Вычисленный коэффициент вариации был следующим:
7,46 % — при внутрклабораторном изучении;
10.99 % — при межлаборагорном изучении.
Эти данные были получены для концентраций ЭХГ от 3.0 до 100 мкг/мл.
15