ГОСТ Р 53430—2009
Из каждого подготовленного разведения делают посев по 1 см3на одну чашку Петри с заранее
промаркированной крышкой. Каждую чашку Петри заливают 10—15 см3 питательной среды КМАФАнМ,
приготовленной по 6.2.3. охлажденнойдо (45 ± 1) 5С, тщательноперемешивают иоставляютдо застыва
ния.
Допускается проведениедвух параллельных определений, то есть проведение посева каждого раз
ведения надве чашки Петри.
После застывания сред чашки Петри переворачивают вверх дном иставят в термостат притемпера
туре (30 ± 1) °Сна 48—72 ч.
8.6.3.3 Обработка результатов
Для подсчета выбираютчашки, на которых выросло от 5 до 150 колоний споровых аэробных ифа
культативно-анаэробных микроорганизмов.
Количество спор аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в 1см3или 1г сырого
молока, сырыхсливок или продуктов переработки молока подсчитывают по8.4.3.
8.6.4 Метод определения спор мезофильных анаэробных бактерий
Определение содержания спор мезофильныханаэробных бактерий проводят поГОСТ25102.
8.6.5 Метод определения дрожжей и плесневых грибов
Определениесодержания дрожжей и плесневых грибов проводят по ГОСТ 10444.12.
8.7 Методы микроскопических исследований
В молочной промышленности микроскопические исследования проводят приизучении микроморфо-
логическихособенностей микрофлоры молока, лабораторных и производственных заквасок, продуктов
переработки молока.
8.7.1 Сущность метода
Методоснован на визуальном наблюдении микроорганизмов с помощью приборов (микроскопов),
позволяющих многократноувеличивать подготовленный исследуемый объект.
При микроскопическом исследовании учитываются как жизнеспособные, так и нежизнеспособные
клетки микроорганизмов, при этом чувствительность метода— не менее 10
е
клеток в 1см3 или 1г иссле
дуемого продукта.
8.7.2 Подготовка к проведению анализа
8.7.2.1 Приготовление микропрепарата
Для приготовления препарата жидкогопродукта по6.3.1 и6.3.2 начистое предметное стекло наносят
петлей каплю продукта и распределяют на площади 1—2 см2.
Для приготовления препарата из творога, творожных продуктов, творожныхсырков, сырных иальбу
минных паст на стекло наносят каплю воды, вводят в нее петлей исследуемый материал, тщательно пере
мешивают и растирают на площади 1—2 см2.
Для приготовления препарата из твердых продуктов — сыр. сырные продукты и т. д. их тщательно
растирают со стерильной водой в стерильной ступке. Затем полученную массу петлей наносят на чистое
предметное стекло и распределяют на площади 1—2см2.
При исследовании колоний микроорганизмов, выросших на твердых питательных средах (агаровая
культура), часть колонии отбирают с помощьюбактериологической петли илииглы итщательно растирают
в капле воды на предметном стекле.
Приготовленные микропрепараты высушивают при комнатном температуре на воздухе.
8J.2.2 Фиксирование микропрепарата
Для закрепления клеток микроорганизмов настекле высушенные микропрепараты фиксируют. Для
этого предметноестекло с высушенным микропрепаратом, обращенным вверх, берут пинцетом ипроводят
3—5раз через верхнюючастьпламени горелки с промежутками в 5-6 с. Зафиксированный микропрепарат
охлаждают на воздухе.
8.7.2.3Окрашивание микропрепарата метиленовым голубым
Зафиксированный микропрепарат помещают на подставку для окраски мазком вверх. Пипеткой
наносят рабочий раствор метиленовогоголубого по6.2.13.2так. чтобы покрыть весь мазок, поистечении
30—60 с красительосторожносливают. Препарат промывают водой.
Окрашенный мазок высушивают на воздухе.
8.7.2.4 Окрашивание микропрепарата по Граму
Зафиксированный микропрепарат помещают на подставкудля окраски мазком вверх, накладывают
полоску фильтровальной бумаги и наливают раствор кристаллического фиолетового по6.2.11.2. Окраску
проводят в течение 1—2мин.
19