ГОСТ Р 53185—2008
Т а б л и ц а 11 — Приготовление стандартных градуировочных растворов
N»run
Мг стандартного
раствора
Вместимость
мерной
колбы, см3
Способ приготовления
Массовая
концентрация.
мг/дм3
1
1
(основной)
S0
Навеску элеутерозидов Е и В массой 10 мг помещают
в мерные колбы вместимостью 50 см3, до половины за
полненные метанолом, перемешивают до полного рас
творения вещества, доводят до метки и тщательно
перемешивают
200
2
2
25
Отбирают 10
cmj
раствора N? 1. переносят в мерную
колбу, доводят метанолом до метки и тщательно пере
мешивают
80
3
3
25
Отбирают 5 см1раствора № 1. переносят в мерную
колбу, доводят метанолом до метки и тщательно пере
мешивают
40
4
4
25
Отбирают 1 см1раствора № 1. переносят в мерную
колбу, доводят метанолом до метки и тщательно пере
мешивают
8
П р и м е ч а н и е — Раствор N? 3 используют в качестве одного из контрольных растворов в повседневных
анализах, поскольку его массовая концентрация наиболее близка ксреднему содержанию элеутерозидов Е и В в
анализируемых пробах.
4.6.4.2 Подготовка образца
Энергетический напиток наливают в химический стакан вместимостью 50 см3 и удаляют газ в токе
азота. Аликвоту напитка 20 см5наносят на патрон Диапак С18. предварительно активированный 10 см3
метиловогоспиртаи 20см3дистиллированнойводы. Патронпромывают30см3дистиллированной воды.
Элеутероэиды смывают 5 см3 метилового спирта. Полученный раствор фильтруют через бумажный
фильтр «синяя лента», затем через мембранныйфильтр с размером пор 0.45 мкм.
4.6.4.3 Приготовление раствора 1%—2 %фосфорной кислоты
1—2 гфосфорнойкислоты помещают вмерную колбуна 100 см3.наполовинузаполненнуюдистил
лированной водой, доводятобъем до метки дистиллированной водой итщательно перемешивают.
4.6.5Проведение измерений методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
4.6.5.1 Приготовление подвижнойфазы
Для приготовления раствора фосфорной кислоты с pH 2.5 500 см3дистиллированной воды поме
щают в стакан идоводят pH до 2.5 с помощью 1%—2 % ортофосфорной кислоты. Полученный раствор
фильтруютчерезкапроновыйфильтрс диаметром пор0,45мкм (подвижнаяфаза А). В качествеподвиж
ной фазы В используют ацетонитрил.
4.6.5.2 Условия хроматографическогоанализа
Условия хроматографического анализа.
колонка no 4.6.3.2;
подвижнаяфаза:
Длительность, мин
А
Раствор HjP04 pH я 2.5. % пообъему
В
Ацетонитрил. % по объему
0
90
10
2
90
10
20
70
30
скоростьподачи элюента 0.8 см3/мин;
детектирование УФ X= 215нм:
объем пробы 10 мм3:
ориентировочные времена удерживания элеутерозида В 3.7 мин иэлеутерозида Е 8.8 мин.
4.6.5.3 Построение градуировочной зависимости
Проводят хроматографическийанализ всех градуировочных растворов элеутерозидов.
24