ГОСТ Р 53185—2008
4.2.4.2 Подготовка образца
Энергетический напиток наливают в химический стакан вместимостью 50 см3и удаляют газ в токе
азота. Аликвотунапиткав 10см3помещаютв мерную колбувместимостью50см3,доводятобъем раство
радистиллированной водой до метки, тщательноперемешиваюти фильтруютчерезскладчатый бумаж
ный фильтрс размером пор0.5 мкм или через капроновыйфильтр.
4.2.5 Проведение измерений методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
4.2.5.1 Приготовление подвижнойфазы
550см3ацетонитрилапомещаютв мерную колбувместимостью 1000см3,доводятдистиллирован
ной водойдо метки иперемешивают. Полученный растворфильтруют через фильтровальную бумагу с
диаметром пор 0.5 мкм или через капроновый фильтр с диаметром пор 0.45 мкм в установке для
фильтрования растворов.
4.2.5.2 Условия хроматографического анализа
Условия ВЭЖХ прианализе энергетических напитков:
колонка по4.2.3.2;
подвижная фаза ацетонитрил-вода (55:45)в процентах пообъему:
скорость потока 1.0 см3/мин;
детектор спектрофотометрический, длина волны /. =210 нм;
аликвота, вводимая в инжектор. 10—15мкл;
ориентировочное время D-глюкуроно-у-лактона (3.9 i 0.3) мин.
4.2.5.3 Построение градуировочной зависимости
Проводятхроматографический анализ всех градуировочных растворов D-глюкуроно-у-лактона.
Регистрируют площади пиков и строят градуировочный график — зависимость площади пика от
массовой концентрации D-глюкуроно-у-лактона в градуировочном растворе.
Процедуры построения градуировочной зависимости выполняют в соответствии с руководством
по эксплуатации оборудования и руководством пользователя программным обеспечением.
Градуировочную зависимость выражаютлинейным уравнением
у - к х .(Ю)
Правильность построения градуировочной зависимости контролируется величиной достовернос
ти аппроксимации (R2)
R2Z0.9997.
Из уравнения (10) следует, что площадь пиков градуировочных растворов D-глюкуроно-у-лактона
S(mV •с или V •с)и их массовая концентрацияс(мг/дм3)находятся в соответствующей функциональной
зависимости
к
гдек — градуировочный коэффициент, [мг/дм3/тУ ■с } \
k a XtSrC,)<12)
£е*
гдеЭ, — площадьпикасоответствующеговещества при анализе/-го стандартногораствора. mAU с или
A U c:
ct— массовая концентрация соответствующего вещества при анализе *-гостандартного раствора.
мг/дм3.
Градуировочную зависимость строят при смене хроматографа, колонок, условий хроматографи
ческого анализа или при выявлении несоответствия метрологическим требованиям результатовопера
тивного контроля или внутреннего аудита.
4.2.5.4 Анализ проб
Проводят хроматографический анализ подготовленных проб по 4.2.4.2. Каждую пробу продукта
анализируют два раза в условиях повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-1
(подраздел 3.14) и ГОСТ Р ИСО 5725-2. Регистрируют площадь пика D-глюкуроно-у-лактона. В случае,
если площадьпика выходитзаграницыдиапазонаградуировкихроматографа, готовятновую менее или
более разбавленную пробу и анализ повторяют.
4.2.6 Обработка результатов определения
Массовую концентрацию D-глюкуроно-у-лактона в пробе продукта рассчитывают по градуировоч
ным зависимостям с учетом степени разведения. Вычисления проводятдо третьегодесятичного знака.
9