ГОСТ 32901—2014
ные клетки микроорганизмов, при этом чувствительность метода - не менее 105 клеток в 1 см3или 1 г
исследуемого продукта.
8.7.2 Подготовка к проведению анализа
8.7.2.1 Приготовление микропрепарата
Для приготовления препарата жидкого продукта по 6.3.1 и 6.3.2 на чистое предметное стекло
наносят петлей каплю продукта и распределяют ее на площади 1-2 см2.
Для приготовления препарата из творога, творожных продуктов, творожных сырков, сырных и
альбуминных ласт на стекло наносят каплю воды, вводот в нее петлей исследуемый материал, тща
тельно перемешивают и растирают на площади 1-2 см2.
Для приготовления препарата из твердых продуктовсыр, сырные продукты и т.д. их тщатель
но растирают со стерильной водой в стерильной ступке. Затем полученную массу петлей наносят на
чистое предметное стекло и распределяют на площади 1-2 см2.
При исследовании колоний микроорганизмов, выросших на твердых питательных средах (ага
ровая культура), часть колонии отбирают с помощью бактериологической петли или иглы и тщатель но
растирают в капле воды на предметном стекле.
Приготовленные микропрепараты высушивают при комнатном температуре на воздухе.
8.7.2.2 Фиксирование микропрепарата
Для закрепления клеток микроорганизмов на стекле высушенные микропрепараты фиксируют.
Для этого предметное стекло с высушенным микропрепаратом, обращенным вверх, берут пинцетом и
проводят 3 5 раз через верхнюю часть пламени горелки с промежутками в 5-6 с. Зафиксированный
микропрепарат охлаждают на воздухе.
8.7.2.3 Окрашивание микропрепарата метиленовым голубым
Зафиксированный микропрепарат помещают на подставку для окраски мазком вверх. Пипеткой
наносят рабочий раствор метиленового голубого по 6.2.13.2 так. чтобы покрыть весь мазок, по исте
чении 30 60 с краситель осторожно сливают. Препарат промывают водой.
Окрашенный мазок высушивают на воздухе.
8.7.2.4 Окрашивание микропрепарата по Граму
Зафиксированный микропрепарат помещают на подставку для окраски мазком вверх, наклады
вают полоску фильтровальной бумаги и наливают раствор кристаллческого фиолетового по 6.2.11.2.
Окраску проводят в течение 1 2 мин.
Снимают бумагу, сливают избыток красителя и, не промывая препарат водой, наливают рас
твор
Л
юголя по 6.2.11.3 на 1 2 мин до почернения препарата.
Раствор
Л
юголя сливают. Предметное стекло погружают несколько раз в этиловый спирт. Про
цесс обесцвечивания считается завершенным, когда от мазка перестают отделяться окрашенные в
фиолетовый цвет струйки жидкости.
Микропрепарат тщательно промывают водой.
Повторную окраску микропрепарата проводят водно-спиртовым раствором фуксина по 6.2.11.5
в течение 2 мин.
8.7.2.5 Подготовка микропрепаратов и окраска по Граму в модификации Г.П. Калины
На предметное стекло в каплю воды с внесенной агаровой культурой, вносят петлей каплю ре
актива 1, приготовленного по 6.2.12.1. Смесь распределяют на площади 1 2 см2, просушивают при (20
±
2) °С и фиксируют по 8.7.2.2. Препарат ополаскивают водой и тщательно просушивают фильт
ровальной бумагой.
После просушивания на препарат наносят с избытком реактив 2. приготовленный по 6.2.12.2,
чтобы жидкость покрывала всю поверхность стекла. Продолжительность окрашивания30 60 с. По
сле окрашивания препарат ополаскивают проточной водой, направляя струю под углом на стекло,
помещенное вертикально. Препарат просушивают фильтровальной бумагой.
Грамположительные микроорганизмы приобретают темно-фиолетовый цвет, а грамотрица-
тельные - красный цвет.
8.7.3 Проведение анализа
Просушенный микропрепарат помещают на предметный столик микроскопа и просматривают
микропрепарат, используя иммерсионную систему. Микроскопирование препаратов дрожжей и плес
невых грибов допускается проводить с меньшим увеличением без использования иммерсионной сис
темы.
8.7.4 Обработка результатов
Состав микрофлоры ферментируемых, в том числе кисломолочных, продуктов при микросколи-
ровании должен соответствовать составу заквасочной микрофлоры, входящей в используемую при их
производстве бактериальную закваску.
Ориентировочный состав микрофлоры кисломолочных продуктов в микропрепаратах приведен
20