ГОСТ 32901—2014
чение (90
±
1) мим или кипячением в течемио 1 ч; для споровых микроорганизмовпри (132
±
2) °С в
течение (90
±
1) мин.
6.1.2 Вымытую и высушенную посуду стерилизуют в сушильном шкафу при температуре (175
±
5) °С в течение 1 ч, или при температуре (160
±
5) °С в течение 2 ч, или в автоклаве при температуре
(121
±
1) ’С в течение (30
±
1) мин с последующим подсушиванием.
Чашки Петри, пипетки и т.п. стерилизуют завернутыми в бумагу или в металлических пеналах.
В конец пипетки предварительно вкладывают кусочек ваты. Резиновые пробки стерилизуют в авто
клаве завернутыми в бумагу.
При отсутствии оборудования для стерилизации при проведении пробы на редуктазу, на сы
чужно-бродильную и сычужную пробы допускается использовать посуду и резиновые пробки, проки
пяченные в дистиллированной воде непосредственно перед испытанием не менее (30
±
1) мин.
Стерильную посуду хранят в плотно закрывающихся шкафах или ящиках с крышками.
Срок хранения стерильной посудыне более 30 сут.
6.2 Приготовление питательных сред и реактивов
6.2.1 Для приготовления растворов питательных сред используют дистиллированную воду или
подготовленную по 6.2.2 питьевую воду.
Для приготовления растворов реактивов используют дистиллированную воду.
6.2.2 Подготовка питьевой воды
Питьевую воду кипятят в открытом сосуде 30 мин, охлаждают до комнатной температуры и вы
держивают на свету в течение 24 ч для разложения соединений хлора. Активная кислотность
подготовленной питьевой воды (далее воды) должна составлять от 6,8 до 7,4 ед pH.
6.2.3 Приготовление питательной среды для определения количества мезофильных
аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов (среда КМАФАнМ)
В колбу достаточной вместимости помещают необходимое количество сухой питательной среды
для определения количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов,
регламентируемое инструкцией производителя, добавляют 1000 см3 воды и тщательно перемешива
ют. Допускается использование дистиллированной воды.
Смесь нагревают до полного растворения среды. При наличии осадка фильтруют и устанавли
вают значение pH (7.0 + 0,2) ед. pH. Среду разливают в пробирки или колбы и стерилизуют при тем
пературе (121
±
1) °С в течение (15
±
1) мин.
6.2.4 Питательные среды для определения и идентификации БГКП
6.2.4.1 Приготовление жидкой питательной среды Кесслер
В колбу достаточной вместимости помещают необходимое количество сухой питательной среды
Кесслер, регламентируемое инструкцией производителя, добавляют небольшое количество воды и
перемешивают. Объем раствора доводят водой до 1000 см3. Допускается использование дистиллиро
ванной воды.
Смесь кипятят, постоянно перемешивая, до полного растворения. При наличии нерастворимого
при кипячении осадка среду фильтруют и устанавливают значение pH (7,4
±
0.2). Среду разливают в
пробирки с поплавками по 5 см3или колбы с поплавками по 40 50 см3и стерилизуют при температуре
(121
±
1) ®Св течение (11 + 1) мин.
Готовая среда должна иметь темно-фиолетовый или темно-синий цвет и поплавки должны быть
полностью заполнены средой.
6.2.4.2 Приготовление твердой питательной среды АЖФК (агар желчный фиолетово-красный)
Необходимое количество сухой среды, регламентируемое инструкцией производителя, вносят в
1 дм3дистиллированной воды, тщательно перемешивают, затем нагревают и кипятят при помешива
нии 5 мин. Среду готовят непосредственно перед посевом.
Готовая среда должна иметь фиолетово-красный цвет.
Допускается хранение в течение 7 сут при температуре (4
±
2) °С приготовленной и разлитой в
пробирки среды, прокипяченной на водяной бане или пастеризованной текучим паром в автоклаве
(30,0
±
0.5) мин.
6.2.4.3 Приготовление среды Эндо
Необходимое количество сухой среды, регламентируемое инструкцией производителя, вносят в
1 дм3дистиллированной воды, тщательно размешивают, затем нагревают и кипятят в течение 3-5
мин, не допуская пригорания. Среду готовят непосредственно перед посевом.
6.2.5 Приготовление раствора хлористого натрия
В мерную колбу вместимостью 1000 см3помещают (8,50
±
0.01) г хлористого натрия. Добавля
ют небольшое количество дистиллированной воды и тщательно перемешивают. Объем раствора до-
8