ГОСТ 32901—2014
или фосфатного буфера, подогретых от 40 сС до 45 °С. и взбалтывают в течение 3 5 мин до возможно
более полного эмульгирования. Получают разведение 1:10.
Из первого разведения 1:10 готовят последующие 1:100 и тщ.
7 Условия проведения анализов
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
температура окружающего воздуха........................................ (20
±
5) °С;
относительная влажность воздуха...................................от 30 % до 80 %;
атмосферное давление.....................................................от 84 до 106 кПа.
8 Методы анализа
8.1 Метод определения уровня бактериальной обсемененности сырого молока - родук-
тазная проба
В процессе жизнедеятельности бактерии выделяют в окружающую среду наряду с другими
окислительно-восстановительными ферментами анаэробные дегидразы. по старой классификации
называемые редуктазами. Существует зависимость между количеством мезофильных аэробных и
факультативно-анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ) в молоке и содержанием в нем редуктаз,
что дает возможность использовать редуктазную пробу как косвенный показатель уровня бактериаль
ной обсемененности сырого молока.
8.1.1 Сущность метода
Метод основан на восстановлении резазурина окислительно-восстановительными фермента
ми. выделяемыми в молоко микроорганизмами. По продолжительности изменения окраски резазури
на оценивают бактериальную обсеменность сырого молока.
8.1.2 Проведение анализа
Пробу с резазурином следует проводить не ранее чем через 2 ч после доения.
В пробирки наливают по 1 см3рабочего раствора резазурина по 6.2.14.2 и по 10 см3исследуе
мого сырого молока, закрывают резиновыми пробками и смешивают путем медленного трехкратного
переворачивания пробирок. Пробирки помещают в редуктазиик с температурой воды (37
±
1) ’С.
При отсутствии редуктазника допускается использовать водяную баню, обеспечивающую под
держание температуры (37
±
1) °С.
Вода в редуктазнике или водяной бане после погружения пробирок с сырым молоком должна
доходить до уровня жидкости в пробирке или быть немного выше, температуру (37
±
1) °С поддержи
вают в течение всего времени определения.
Пробирки с сырым молоком и резазурином на протяжении анализа должны быть защищены от
света прямых солнечных лучей (редуктазник должен быть плотно закрыт крышкой).
Время погружения пробирок в редуктазник считают началом анализа.
По истечении 1 ч пробирки вынимают из редуктазника и снимают показания. Появление окра
шивания молока в этих пробирках при встряхивании не учитывают.
Пробирки с молоком, имеющие серо-сиреневую окраску до сиреневой со слабым серым оттен
ком. оставляют в редуктазнике еще на 30 мин
8.1.3 Обработка результатов
В зависимости от изменения цвета молоко относят к одному из классов в соответствии табли
цей 1.
Т а б л и ц а
1
Класс
Продолжительность
изменения цвета
Окраска молока
Ориентировочное коли
чество бактерий
в 1
c m j
молока
I
Через 1 ч
От серо-сиреневой до сиреневой
со слабым серым оттенком
До 500 тыс
IIЧерез 1 ч
Сиреневая с розовым оттенком
или ярко розовая
Более 500 тыс
П р и м е ч а н и я :
1 Пробы сырого молока через 1.5 ч выдержки с окраской от серо-сиреневой до сиреневой со слабым серым
опенком имеют ориентировочную бактериальную обсемененность менее 300 тыс.
2 Пробы сырого молока через 1 ч выдержки с окраской от бледно-розовой до белой имеют ориентировочную
бактериальную обсемененность более 4 млн.
12