ГОСТ Р 51352—2013
5.4.12.4 Определение pH
Определение pH питательных сред проводят с помощью потенциометра. Если значение pH изго
товленной среды не соответствует требуемым значениям, проводят коррекцию добавлением кислоты
или щелочи, или готовят новую партию.
5.4.12.5 Определение стерильности
Определение стерильности готовой среды проводят визуально путем просмотра от 3 % до 5 %
каждой партии после инкубации в термостате при температуре 37 X в течение от 2 до 14 суток в зави
симости от типа среды.
5.4.12.6 Определение чистоты розлива
Среды, приготавливаемые из сухих компонентов и (или) разливаемые в лаборатории в чашки
(пробирки), контролируют на чистоту розлива. В зависимости от объёма розлива необходимо проверять от
1 до 2 чашек (пробирок) или 1 % чашек или пробирок в начале и столько же в конце процесса розлива
среды. Чашки (пробирки) следует инкубировать не менее 18 ч при 37 X или в условиях инкубирования,
рекомендуемых для каждой среды.
5.4.12.7 Определение специфической активности
Контроль специфической активности питательных сред необходимо проводить с применением
расширенного набора контрольных штаммов, включающего референтные штаммы. Референтные
штаммы могут быть получены из специализированных коллекций:
Государственнаяколлекцияпатогенныхмикроорганизмов(ФГБУГИСКим.
Л.А.Тарасевича Роспотребнадзора на базе ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского
применения» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации):
Всероссийская коллекция промышленных микроорганизмов (ВКПМ) ФГУПГосНИИГенети-
ка:
Всесоюзная коллекция непатогенных микроорганизмов (ИБФМ);
Американская коллекция типовых культур (АТСС);
Английская национальная коллекция типовых культур (NCTC).
Изоляты микроорганизмов, выделенные из клинического материала и используемые для кон
троля, должны по свойствам соответствовать микроорганизмам признанных национальных и между
народных коллекций.
Перечень (панель) контрольных штаммов, необходимая для контроля качества каждой питатель
ной среды, определяется ее назначением, т.е. должен состоять, как правило, из нескольких штаммов,
моделирующих натурные условия применения среды.
Применяемые для контроля штаммы (из лиофилизированного состояния или со среды хранения)
не должны проходить более трёх последовательных пересевов на питательные среды, а свежевыде-
ленные штаммы с момента выделения и получения их в виде чистых культур не должны проходить бо
лее 3-5 последовательных пересевов. Они должны быть типичными по культуральным, морфологиче
ским. биохимическим и серологическим тинкториальным свойствам, а также проверяться на отсутствие
диссоциации.
Готовую среду засевают культурой (штаммом) целевого микроорганизма (102-103КОЕ/мл). для ко
торого приготовлена среда и штаммов-ассоциантов (ЮМО6 КОЕУмл) и визуально (или под малым уве
личением микроскопа) изучают характер роста.
Рост микроорганизмов оценивают с помощью количественных (для плотных сред), полуколиче-
ственных или качественных методов. Количество образцов одной серии среды для контроля - не менее
трех.
Для всех типов сред (сухие, готовые, плотные, жидкие, дифференциальные, селективные, транс
портные. для культивирования и тщ.) определяют чувствительность, скорость роста культуры, а также
стабильность основных биологических свойств штамма при росте на исследуемой среде.
5.4.12.8 Скорость роста
Скорость роста (ч) определяют по минимальному времени инкубации посевов, за которое при со
ответствующем разведении обеспечивается отчетливый (не менее 100 жизнеспособных клеток) види
мый невооруженным глазом рост культуры (помутнение, наличие пленки, осадка, роста по уклону и др.) во
всех засеянных пробирках с жидкими (полужидкими) питательными средами или формирование ти
пичных. легко дифференцируемых колоний на чашках (пробирках) с плотной средой.
Полухоличественная оценка роста должна быть выполнена с помощью шкалы роста, например от
0 до 3 плюсов (♦).
5.4.12.9 Чувствительность среды
Чувствительность среды определяют как максимальное разведение культуры (штамма), обеспе
чивающее визуально обнаруживаемый рост колоний искомого штамма в течение определенного време ни
и температуре на всех засеянных чашках (пробирках) с питательной средой.
Качественным методом определяют наличие и характер роста каждого из контрольных штаммов.
20