ГОСТ Р 51352—2013
бы со средней и даже низкой концентрацией анализируемого вещества. Для разведения следует ис
пользовать нулевую калибровочную пробу или сыворотку (плазму) крови, не содержащую исследуемый
антиген.
Тест на «линейность»
Л
%. проводят в восьми-десяти повторностях. В анализируемых образцах
определяют концентрацию исследуемого антигена, умножают на коэффициент разведения и сравнива ют
ее значение с расчетным по формуле:
где Сго — полученное по калибровочному графику (практическое) значение концентрации анализируе
мого антигена в исследуемой пробе:
Ст —расчетное (теоретическое) значение концентрации антигена в исследуемой пробе.
Значение «линейности» должно находиться в пределах от 90 % до 110 %.
Тест на «линейность» важен тем. что позволяет проконтролировать, насколько правильно калиб
рованы калибровочные пробы относительно друг друга. При разведении одной калибровочной пробы
идет сравнение этой пробы с калибровочными пробами, близкими по концентрации к полученным ре
зультатам.
Тест на «линейность» позволяет устранить систематические ошибки, связанные с различной спе
цифичностью анализа, на кахщой стадии калибровки, а также позволяет оценить правильность работы
системы для радиоиммунологического анализа на всех участках калибровочного графика.
В случае экспериментальной проверки качества изделия, предназначенного для определения ан
тигена (антител) в сухих пятнах крови, тест на «линейность» не проводят.
5.4.1.10 Коэффициент вариации
При определении коэффициента вариации следует использовать аттестованные контрольные сы
воротки (плазмы, сухие пятна крови) с низким, средним или высоким содержанием анализируемого анти
гена. Контроль воспроизводимости проводят в восьми-десяти повторностях. Воспроизводимость прове
ряют как для одного изделия, так и для разных изделий одной серии и изделий разных серий.
Значение коэффициента вариации К.В., %. определяют по формуле:
где С,—значение каждого измерения концентрации анализируемого антигена в контрольной сыворот-
(7)
(
8
)
—среднее арифметическое значение концентрации анализируемого антигена в контрольной сы
воротке;
I—знак суммирования:
п—
число определений.
Воспроизводимость результатов считается удовлетворительной, если значение К.В. не превышает
8 % при проведении анализа в биологических жидкостях и 15 % - при проведении анализа в сухих пятнах
биологических жидкостей.
5.4.1.11 Интерсепт
Значение интерсепта определяют по калибровочному графику, построенному в координатах
logit-log (на оси ординат откладывают значение соотношения схоростей счета калибровочных проб - В* и
нулевой калибровочной пробы - В0, а на оси абсцисс - значение концентрации антигена в логарифмиче
ском масштабе). Если работа изделия основана на принципе конкурентного связывания, то
используют соотношение Вх/Во х 100. если на принципе сэндвич-варианта - соотношение [(Вх-
ВоУ(Вш»с-Во) х 100). Значение интерсепта выражают в тех же единицах, что и значение концентрации
анализируемого анти гена.
При контроле качества изделий для радиоиммунологического анализа обычно пользуются тремя
значениями интерсепта - 20 % (25 %), 50 % и 80 % (75 %), хотя допускаются и другие варианты. Отрезок
калибровочного графика, ограниченный значениями 20 % и 80 % интерсепта. - это «рабочий» отрезок
калибровочного графика, являющийся наиболее чувствительной его частью. Значение 50 % интерсепта
должно лежать на самой крутой части калибровочного графика и должно соответствовать одной и той же
13