С. 7 ГОСТ 21237-75
3.1.14. П р и г о т о в л е н и е п е п т о н н о-у г л е в о д н ы х с р е д ( с р е д ы Г и с с а)
К 100 см*дистиллированной воды прибавляют 1г сухого ферментативного пептона, 0.5 г хлори
стого натрия и нагревают до растворения, затем фильтруютдо тех пор, пока раствор не станет совер
шенно прозрачным. Устанавливают pH 0.7, прибавляют 0,5 гуглевода и 1см5индикатора Андреде.
Среду разливают по 5 см’в пробирки с поплавками и стерилизуют 20 мин при температуре
110 “С. Среда должна быть бесцветной или соломенно-желтого цвета, без розового оттенка. Можно
использовать готовые среды Гисса.
Для приготовления индикатора Андреде к 100см1дистиллированной воды добавляют 16,4см3
1 моль/дм* раствора гидроокиси натрия и 0,5 г кислого фуксина. Раствор стерилизуют 5 мин при
температуре 110—112‘С. Индикатор хранят всклянке из темного стекла.
(Измененная редакция, Изм. № 2).
3.1.15. П р и г о т о в л е н и е п е п т о н н о йв о д ы
К 1000см*дистиллированной воды добавляют 10 г пептона и 5 г хлористою натрия, кипятят до
растворения пептона, фильтруют и устанавливают pH 7.2—7.4, после чего стерилизуют 30 мин при
температуре 120“С.
3.1.16. П р и г о т о в л е н и е п л а з м ы к р о в и
В пробирку вносят 2см35%-ного раствора лимоннокислого натрия и 8см5только что полученной
крови кролика. Цитратную кровь ставят на 18—20 ч в холодильник при температуре 4—6 ’С или
подвергают центрифугированию при 3000 об/мин в течение 15 мин. В результате чего над осадком
эритроцитовобразуется прозрачный слой жидкости желтоватого цвета —плазмы, которую разводят
физиологическим раствором 1:4.
3.1.17. П р и г о т о в л е н и е д с ф и б р и н и р о в а н н о й к р о в и
Вколбу со стеклянными бусами сливают 8 см’ только что взятой крови кролика, барана, лошади
и непрерывно встряхивают в течение 10—15 мин, в результате чего находящийся в крови фибрин
выпадает восадок, обволакивает бусы. Дефибринировапную кровь сливают в другую колбу или про
бирку. Слитаядефибринированная кровь утрачивает способность свертываться.
3.1.18. П р и г о т о в л е н и е к р о в я н о г о а г а р а
К 100 см1расплавленного стерильного мясо-пептонного агара, приготовленного по п. 3.1.1 и
охлажденного до температуры 45 "С, стерильно прибавляют 5—10см’ стерильно взятой дефибриниро-
ванной крови. Готовую среду разливают встерильные чашки Петри, дают ей застыть и подсушивают в
термостате при температуре 37 *С. Слой агара должен быть равномерноокрашен в красный цвет.
3.1.19. П р и г о т о в л е н и е а г а р а С и м м о н с а
В 1000см*дистиллированной воды растворяют 5 гхлористого натрия, 0.2 гсернокислого магния,
1.5 гфосфорнокислого натрия-аммония, 2 гдвузамешепного фосфорнокислого калия, 5 г нейтрально
голимоннокислого натрия, 20 г агара. Раствор фильтруют, добавляют 40см’ раствора бром
тимолового синего (1:500). Среду разливают в пробирки по 5—6 см3в каждую, стерилизуют
притемпературе 120 ‘С в течение 20 мин, после чего скашивают. Готовая среда должна
бытьоливкового цвета.
3.1.20. П р и г о т о в л е н и е с р е д ы Г о с у д а р с т в е н н о г о к о н т р о л ь н о г о
и н с т и т у т а (ГКИ)
В стерильную колбу наливают 60 см*раствора Хенкса и добавляют стерильно 40см*сыворотки
крови крупного рогатогоскота, прогретой при температуре 56 “С втечение 30 мин. После тщательного
перемешивания устанавливают pH 7,2 раствором двууглекислого натрия и разливают среду по 2 см’в
стерильные пробирки, которые закрывают стерильными резиновыми пробками. Среду можно хранить
при температуре 4 С до четырех месяцев.
3.1.21. П р и г о т о в л е н и е с р е д ы Д р о ж ж е в к и и о й
К 10 см3стерильного желтка куриного яйца добавляют 90 см’ физиологического раствора, тща
тельно перемешивают. Смесь разливаютпо 8см’ встерильные пробирки. Перед употреблением прове
ряют стерильность среды, поместивее в термостат при температуре 37 *Сна 48 ч.
3.1.22. П р и г о т о в л е н и е с р е д ы К и т т-Т а р о ц ц и
Свежую печень крупного рогатого скота разрезают на куски массой по 50—60 г, заливают
равным количеством поды и кипятят в течение 30 мин при постоянном помешивании. Печеночный
экстракт фильтруют через ватно-марлевый фильтр и смешивают с мясо-пептонным бульоном из
расчетаодна часть печеночного экстракта на три части бульона. Смесь нагревают до кипения, добавля
ют хлористый натрий из расчета 1,25 г на 1000 см1среды и устанавливают pH 7,6—7,8, после чего
кипятят втечение 15 мин и фильтруют через бумажный фильтр.