ГОСТ 21237-75 С. 10
3.3.3. Каждую пробу в отдельности помешают встерильный стакан (колбу) гомогенизатора для
приготовления взвеси. Для этого в стакан (колбу) добавляют по 15 см1физиологического раствора,
количество которого равно массе каждой пробы, и гомогенизируют пробы в электрическом гомогени
заторе. Вначале измельчают материал замедленной частотой оборотов, затем с большей частотой оборо
тов не более 2.5 мин (в зависимости от числа оборотов).
1см5приготовленной взвеси содержит 0.5 г продукта.
3.3.4. Полученные взвеси отстаивают 10 мин. Из верхней части надосадочной жидкости пипеткой
Пастера или петлей вносят на чашку с мясо-пептонным агаром и элективной средой (Эндо. Левина)
одну-две капли или одну петлю итщательно втирают материал в поверхность предварительно подсу
шенных сред.
3.3.5. Одновременное посевом на плотные среды производят посев материала для накопления
сальмонелл в одну из сред обогащения (селенитовый Ф-бульон, Мюллера, Кауфмана, Киллиана,
хлористомагниевую среду «М»>.Для этого 20см1взвеси из мыши илимфатических углов вносят в один
флакон (колбу), а 20см’ взвеси из паренхиматозных органов —вдругой. Вкаждый флакон наливают
по 50см’ среды обогащения.
При отсутствии гомогенизатора допускается посев кусочка пробы размером не менее
2,0 1.5 2,5 см (путем нанесения отпечатков разными сторонами пробы на поверхность питательной
среды вчашках с предварительно подсушенным мясо-пептонным агаром и элективной средой
Эндо, Левина). При этом необходимо произвести также посев на элективные среды
излимфатического утла печени или соскоба с внутренней стенки желчного пузыря. Посев в среду
обогащения производят во флаконы Сокслста (колбы), в которые предварительно налито по 50
см4среды обогащения (селенито вой Ф-бульон, Мюллера, Кауфмана. Киллиана, хлористомагниевая
среда *М»), Водин флакон вносит ся измельченная проба из мышц и лимфатических узлов массой
10 г, а в другой — 10 г из паренхима тозных органов.
Следует иметь в виду, что на селенитовом Ф-бульоне S. typhi suis и S. cholerae suis, как правило,
не растут. Наилучший рост S. cholerae suis наблюдается на среде Киллиана.
3.3.6. Посевы помещают в термостат при температуре 37 *С. Через 18 ч чашки с первичными
посевами на плотныхсредах извлекают из термостата и просматривают визуально, при необходимости
— черезлупу или под малым увеличением микроскопа.
При отсутствии роста через 18 ч посевы выдерживают втермостате дополнительно до 24 ч.
На мясо-пептопиом агаре отыскивают колонии, характерные для сибирской язвы, рожи, пасте-
реллеза. лнетериоза, кокковых инфекций идр.
На чашках с элективными средами (Эндо, Левина) отыскивают колонии, характерные для
бактерий семейства кишечных.
При обнаружении в мазках микробов, подозрительных на сибирскую язву, посевы на электив
ную среду и среду обогащения не производят.
4. ПРОВЕДЕНИИ ИССЛЕДОВАНИЙ
4.1. Бактерноскопическое исследование
Из паренхиматозных органов (печени, почек, селезенки) лимфатических угзлов туши или из
пораженных участков органа и ткани приготоатяют 2—10 мазков-отпечатков (в зависимости от харак
тера патологических изменений и предполагаемого диагноза).
Препараты высушивают на воздухе, фиксируют и окрашивают одновременно и по Граму и
2 %-ным раствором сафранина или раствором Ребигера.
При бактериоскопии мазков прежде всего обращают внимание на наличие возбудителя сибирс
кой язвы.
При окраске сафранином сибиреязвенные бациллы окрашиваются в кирпично-красный цвет, а
капсулы, тени (следы распада бактерий) —всветло-желтый.
При окраске раствором Ребигера сибиреязвенные бациллы окрашиваются втемно-фиолетовый
цвет, а капсулы —в красно-фиолетовый.
Вмазках излимфатических узлов или других тканей свиней, крупного рогатого скота при очаго
вом поражении, наряду с типичными капсульными палочками, могут обнаруживаться атипичные
бациллы сибирской язвы в виде сильно изогнутых или перекрученных длинных нитей, разбухших
и потерявших правильные контуры, или распавшихся на отдельные, как бы осколки бацилл или
теней различной величины, отрицательно окрашивающихся по Граму или в виде конгломерата
капсул, наполненных мельчайшими включениями.
14-2264