ГОСТ21237-75 С. 6
3.1.8. П р и г о т о в л е н и ес р е д ыК а у ф м а н а
К 500 см! стерильной среды Мюллера, приготовленной по п. 3.1.7, добаатяют 25 см* стерильной
желчи крупного рогатого скота и 5 см10.1 %-ного водного раствора бриллиантовой зелени. Смесь
хорошо взбалтывают, разливают в стерильные флаконы, но не стерилизуют.
3.1.9. П р и г о т о в л е н и ес е л е н и т о в о г о Ф-б у л ь о и а
Среду готовят из двух основных растворов —А и Б.
Раствор Л состоит из 5 г пептона чешской фирмы «Спофа» или венгерской фирмы «Рихтер», 7 г
безводного двузамешенного фосфорнокислого натрия. 3 годнозамешенного фосфорнокислого натрия,
4 г х.ч. лактозы, 100 см’ дистиллированной воды, pH раствора 6.9—7.1. Раствор стерилизуют 30 мин
при температуре 112 *С.
Раствор Б состоит из 10 %-ного раствора кислого селенистокислого натрия, приготовленного на
стерильной воде. Растворготовят непосредственно перед употреблением.
При изменении серии любого из входящих всреду компонентов (пептона, кислого селенисто-
кислого натрия, фосфатов) проводят предварительно подтитровку, для чего экспериментально опре
деляютточную пропорцию фосфорнокислогодвузамешенного безводного натрия и фосфорнокислого
однозамешенного натрия, которая с используемыми образцами пептона и селенистокислого натрия
дает pH не выше 6,9—7,1, что регулируется изменением соотношения фосфатов.
Для приготовления селенитовой среды к 50см1раствора Астерильнодобавляют 2см’раствора Б.
Среду разливают в стерильные флаконы или колбы, но не стерилизуют.
3.1.10. П р и г о т о в л е н и ех л о р и с т о м а г ни с в о йс р е д ы «М» ( моли ф и
нн р о и а н II о й)
Среду готовят из трех основных растворов А, Б и В.
Для приготовления раствора А в90 см*дистиллированной воды растворяют 0,42 гсухогофермен
тативного пептона, 0,7 г хлористого натрия, 0.15 г однозамешенного фосфорнокислого калия. 4 см5
дрожжевого диализата.
Для приготовления раствора Б в 9см’ дистиллированной воды растворяют 3.6 г кристаллического
хлористого магния.
Раствор В состоит из 0.09 см* 5 %-ного водного раствора бриллиантовой зелени.
Для приготовления хлористомагниевой среды «М» (модифицированной) растворы А, Б и В сме
шивают и стерилизуют 30 мин при температуре 112,5 *С.
Концентрированную среду готовят, удваивая содержание всех компонентов, кроме дистиллиро
ванной воды.
При отсутствии дрожжевого диализата допускается применятьдрожжевой экстракт.
3.1.11. П р и г о т о в л е н и е д р о ж ж е в о г о э к с т р а к т а
В 2000 см* дистиллированной воды растворяют 1000 г прессованных хлебопекарных дрожжей.
Полученную суспензию стерилизуют 30 мин текучим паром, затем отстаивают в холодильнике при
температуре 4 *С в течение 5—6 суток.
Жидкость над осадком декантируют, приливают 2,5 см*0.01 %-ного раствора кристаллического
фиолетового, разливают во флаконы или пробирки и вновь стерилизуют при температуре 100 "С в
течение 30 мин. Экстракт хранят в холодильнике при температуре 4—6 *Сдодвух недель.
3.1.12. П р и г о т о в л е н и е с р е д ы К и л л и а н а
К 100 см*стерильного питательного бульона (pH 6,8—6,9) стерильнодобавляют I см* 0,1 %-ного
раствора бриллиантовой зелени. Раствор бриллиантовой зелени готовят следующим образом: 0.1 г
бриллиантовой зелени заливают 100 см1дистиллированной воды, помешают вофлаконы с резиновой
или корковой пробкой и помешают втермостат при температуре 37 *Сна сутки.
3.1.13. П р и г о т о в л е н и ет р е х с а х а р н о г оа г а р асм о ч е в и н о й
(К р у м в и д е-О л ь к е и и ц к о г о в м о д и ф и к а ц и и К о в а л ь ч у к а )
В 1000 см*дистиллированной воды растворяют 2 г глюкозы, 3,5 г сахарозы, 15 глактозы, 0,6 г
соли Мора, 1г серноватистокислого натрия и 10 гмочевины. Соль Мора и серноватистокислый натрий
предварительно растворяют в 5—7 см’дистиллированной воды в пробирках. Углеводы и мочевину
также растворяют в 10см*дистиллированной воды в колбе на водяной бане. До стерилизации устанав
ливают pH 7,4—7,6 идобавляют 46 г сухой среды с сахарозой и индикатором «ВР*. Раствор размеши
вают и кипятят до расплавления агара, разливают в пробирки по 5—6 см’ в каждую. Среду, разлитую в
пробирки, стерилизуют текучим паром 2дня по 30 мин или при температуре 112 “С втечение 20мин.
После стерилизации среду скашивают так. чтобы остался небольшой столбик (не менее 3 см).