С. 9 ГОСТ 21237-75
3.1.31. П р и г о т о в л е н и е к а р б о л о в о г оф у к с и н а Ц и л я
1г основного кристаллического фуксина растирают в ступке с 5 г кристаллической карболовой
кислоты (фенола) и 0.5 см1глицерина. Во время растирания небольшими порциями прибавляют 10см
% ’ этилового спирта. После того, как краска полностью разотрется, прибавляют при
постоянном помешивании 100см5дистиллированной воды. Раствор краскифильтруют. Фуксин Циля
стойкий и его хранят вофлаконах из темного стекла с притертой пробкой.
3.1.32. П р и г о т о в л е н и е к а р б о л о в о г ок р и с т а л л и ч е с к о г оф и о л е
т о в о г о .г е н ц и а н-ф и о л е т о в о г ои л им е т и л о в о г оф и о л е т о в о г о
д л я о к р а с к и по Г р а м у
1г кристалл-, генциан- или метил виолета растирают вступке с 2 г кристаллической карболовой
кислоты (фенола). Во время растирания небольшими порциями прибавляют К) см’ % *этилового
спирта. Посте того, как краска полностью растворится, прибавляют при постоянном помешивании
100 см5дистиллированной воды. Раствор краски фильтруют черезбумажный фильтр. Растворы нестой кие.
3.1.33. П р и г о т о в л е н и е к р а с я щ е й б у м а г ипо С и н е в у
В 100 см’ 96 *этилового спирта растворяют 1 г кристаллвиолета и 1 см’ глицерина. Краску
наливают в лоток. Бумагу нарезают полосками шириной 2,0—2,5 см и длиной 30—50 см. Полоску
погружают на несколько секунд в краску так. чтобы она окрасилась с обеих сторон. Окрашенные
полоски вынимают пинцетом, дают краске стечь и подвешивают на шпагате для высушивания. Бумагу
сушат на воздухе при комнатной температуре 18—23 ‘С. Высушенные полоски бумаги разрезают на
кусочки размером 2-2 см и хранят в банке из темного стекла.
3.1.34. П р и г о т о в л е н и е р а с т в о р а Л ю г о л я
В К)см’дистиллированной воды растворяют 2 г йодистого калия. Затем прибавляют 1г кристал
лического йода. Раствор выдерживают 5—6 ч до полного растворения йода, после чего прибавляют
290см*дистиллированной «юлы. Храпят раствор всклянке из темного стекла.
3.2. Окраска препаратов
3.2.1. О к р а с к а м а з к о в по Г р а м у ( о б щ е п р и н я т а я м о д и ф и к а ц и я )
На фиксированный мазок помещают полоску фильтровальной бумаги и наливают карболовый
геннианвнолет. Выдерживают 1—2 мин. после чего снимаютбумажку, сливают краску, мазок промы
вают водой и наливают на него раствор Люголя (мазок чернеет). Через 1—2 мин раствор сливают и
наливают этиловый спирт на 0,5—1мин. Затем мазок промывают водой идополнительно окрашивают
водным фуксином или водным раствором сафранина в течение I 2 мин. Затем промывают водой и
просушивают мазок фильтровальной бумагой.
Окраску по Граму можно применять в водоизменепии Синева, согласно которому вместо карбо
лового генцианвиолета применяют окрашенные полоски фильтровальной бумаги, приготовленной по
п. 3.1.33. Для окрашивания мазков на фиксированный мазок накладывают полоску фильтровальной
бумаги, пропитанной спиртовым раствором кристаллвиолета, и наносят две-три капли воды, которые
полностью впитываются бумагой, последняя плотно прилегает к стеклу. Выдерживают 2 мин, затем
бумагу удаляют пинцетом и дальнейшую окраску производят по Граму.
3.2.2. О к р а с к а к а п с у л м е т о д о м О л ь т а
Мазки окрашивают 2 %-ным водным раствором сафранина в течение 1—3 мин (лучше при
подогревании) и быстро смывают водой. Раствор сафранина готовят перед употреблением: сафранин
растворяют в воде, доведенной до кипения и фильтруют через бумажный фильтр.
3.2.3. О к р а с к а к а п с у л м е т о д о м Р е б и г е р а
Мазки окрашивают и фиксируют одновременно. Готовят раствор: 15—20 г генцианвиолета ра
створяют в 100 см140 %-ного формалина. Раствор оставляют на 8—10 ч при температуре 20 *С,
фильтруют, после чего он готов к употреблению. Окрашивают нефиксированные мазки в течение
15—20 с, быстро промывают водой и высушивают фильтровальной бумагой.
3.3. Подготовка образцов к исследованию и проведению посева
3.3.1. Каждый представленный к исследованию образец (мышцы, лимфатические узлы, паренхи
матозные органы) перед посевом освобождают от видимой жировой и соединительной ткани, погру
жают на 2—3 мин в спирт и два раза обжигают с поверхности. Затем стерильными ножницами из
глубины различных мест каждого образца вырезают кусочки размером не менее 2,0-1,5-2,5 см; лим
фатические узлы разрезают пополам. Затем все выре занные кусочки измельчают стерильными ножни
цами.
3.3.2. Для посева составляютдве пробы по 15 гкаждая. Одна проба состоит из кусочков мышц и
лимфатических узлов, а вторая —из кусочков паренхиматозных органов (печени, почки и селезенки).