С. 15 ГОСТ 21237-75
почками, гроздями и в виде ланцетовидных диплококков), а также определения характера роста на
питательных средах.
На мясо-пептонном бульоне стафилококки идиплококки дают равномерное помутнение с выпа
дением обильного осадка.
При росте стрептококков на бульоне с 2 % глюкозы бульон остается прозрачным, а на дно
пробирки вып&таетосадок.
Патогенностьстафилококков определяют реакцией коагулирования плазмы крови.
Плазму крови кролика, приготовленную по п. 3.1.16. panивают по 0,5 см5в две стерильные
пробирки, в одну пробирку вносят петлей суточную агаровую культуру испытуемого стафилококка,
другая пробирка является контрольной. Внесенную культурутщательно перемешивают, после чего обе
пробирки помещают втермостат при температуре 37 *С. Пробирки осторожно, избегая встряхивания,
просматривают. Результаты реакции коагуляции учитывают в течение 2—4 ч и через 24 ч. Штаммы
стафилококка, продуцирующие фермент плазмокоагулазу, вызывают свертывание плазмы, вследствие
чего она превращается в студнеобразную массу, не выливающуюся при перевертывании пробирки.
Свертывание плазмы обозначается знаком •+* с указанием времени, в течение которого произошла
реакция.
4.2.3.3. Обработкарезультатов
При получении положительной реакции плазмокоагуляиии считается, что в мясе обнаружен
патогенный стафилококк.
4.2.4. В ы я в л е н и е б а к т е р и й р о д ас а л ь м о н е л л
4.2.4.1. Сущность метода выявления с&зьмонелл заключается вопределении их характерного роста
на элективных средах и установлении ферментативных и серологических свойств сальмонелл.
4.2.4.2. Прте<книеисаедования
Выявление сальмонелл проводится в четыре последовательных этапа: первичный (прямой) по
сев, обогащение, посев со среды обогащения и подтверждение.
Первичный посев производится путем посева взвеси исследуемого материала на плотные элек
тивные среды. Эти среды выдерживают втермостате при температуре 37 *С и исследуют на присутствие
колоний, которые являются типичными или подозрительными на сальмонеллы.
На элективных средах сальмонеллы растут, образуя характерные колонии:
- на фуксин-сульфитном агаре (агаре Эндо) сальмонеллы растут в виде круглых, бесцветных или
слегка розоватых прозрачных, или полупрозрачных колоний;
- на эозин-метиленовом синем агаре (агаре Левина) сальмонеллы растут в виде прозрачных,
бледных, нежно-розовых или розовато-фиолетовых колоний.
Обогащение проводят путем посева на жидкие селективные среды. Эти среды выдерживают в
термостате при температуре 37 ‘С. На селенитовом Ф-бульоне лучшей температурой для накопления
сальмонелл является 43 ’С. Пересев производят после обогащения изжидких сред на плотные селектив
ные диагностические среды, которые после термостатировання при температуре 37 С исследуют на
присутствие колоний типичных или подозрительных на сальмонеллы.
На селективных средах сальмонеллы растут, образуя характерные колонии:
- на бактоагаре Плоскирева сатьмопеллы растут в виде бесцветных колоний, но колонии более
плотные и несколько меньшего размера, чем на среде Эндо;
- на висмут-сульфитном агаре сальмонеллы, как правило, растут в виде черных или коричневых
колоний с характерным металлическим блеском. При этом наблюдается прокрашивание в черный цвет
участка среды под колонией. Исключение составляют некоторые серологические типы из группы С.
которые на этой среде растут в виде нежных светло-зеленых или крупных серовато-зеленых колоний.
Подтверждение наличия бактерий из родасальмонелл проводят путем определения соответствую
щих биохимических и серологических свойств колоний.
В случае отсутствия роста бактерий сальмонелл при первичном (прямом) посеве на элективных
средах, через 12—24 ч проводят высев на селективные среды со сред обогащения: из сред Мюллера,
Кауфмана и Киллиана через 12—16 ч. из селенитового Ф-бульона и хлористо-магниевой среды *М»
через 18—24 ч.
Содержимое флаконов перед пересевом тщательно перемешивают и высевают штрихом петлей
диаметром 2,5—3 мм на чашку с висмут-сульфитным агаром, бактоагаром Плоскирева или агаром
Эндо.
Посевы помешают в термостат на 18—24 ч при температуре 37 "С. а посевы на висмут-сульфит
ном агаре —на 48 ч.
При обнаружении на чашках роста подозрительных колоний исследуют три—пять колоний с
каждой чашки.