ГОСТ Р 52810—2007
Осторожно удаляют гребенку изаполняютлунки раствором ацетатного буфера, приготовленного
по4.1.1.2 б), для предохранения геляот высыхания.
Предварительный электрофорез проводят при напряжении постоянного тока 100 В в течение 1ч
для очистки геля, затем растворацетатного буфера сливают.
4.1.1.6 Проведениеанализа
Камерудляэлектрофореза заполняютсвежим раствором ацетатного буфера, приготовленным по
4.1.1.2 б). С помощью одноканальной микролипетки со сменным наконечником помещают экстракты
анализируемых проб объемом 0.07 см3на дно лунок. Контрольный экстракт помещают в любую лунку,
кромедвух внешних, воднуизлунок вносят 0,05см3раствора метилового зеленого, приготовленного по
4.1.1.2 л). Включают источник питания.
Электрофорез проводятпри20 °С. Втечение 1ч поддерживаютнапряжение 100 В. затемего повы
шаютдо 250 В. Разделение белка проводят в течение 5 — 6ч.
Послеокончанияанализа выключаютисточникпитания, сливаютверхний слой раствораацетатно
го буфера иотсоединяют гелевые кассеты от камеры для электрофореза. Открывают кассеты, вынима
ют гели и помещаюткаждый в пластмассовыйконтейнер, содержащий 100 см3окрашивающегораствора
бриллиантового синего, приготовленного по 4.1.1.2 к). Контейнеры устанавливают в смеситель и осто
рожно встряхиваютсодержимое в течение4 — 18ч при 50 об/мин. Для усиления окраски гели промыва
ют дистиллированной водой. Гели помещают в стеклянные поддоны (лотки) иосушают их.
4.1.1.7 Обработка результатов
Визуально исследуют гель или его фотографию и отмечают положение, а также интенсивности
полосе сравнениис характернымиполосамиспектраконтрольногообразца, которыйтакже был проана
лизирован. Идентификацию проводятсравнением полученногоспектра с известными спектрамив соот
ветствии с приложением А.
П р и м е ч а н и е — При фотографировании устанавливают фотоаппарат на штативе над источником флуо
ресцентного освещения, помещают очищенный гель в стеклянный лоток под фотоаппарат и. освещая гель только
снизу, фотографируют его.
4.1.2Определение наличия муки из мягкой пшеницы методом выделения пальмитата
|Ч:итостерола
Метод определения основан на различной растворимости пальмитата |^ситостерола в ацетоне
при различных температурах.
4.1.2.1 Аппаратура, материалы иреактивы
Весы лабораторные с пределом допускаемой погрешности взвешивания ± 0,01 г и i 0,001 г по
ГОСТ24104.
Термостат, поддерживающийтемпературуот 40 ’’Сдо 98 °С.
Шкафсушильныйэлектрический, обеспечивающий нагревдо 150 °С спогрешностью поддержания
температуры не более 1°С.
Фотометр, обеспечивающий возможность измерения интенсивности пропускания света сдлиной
волны 640 нм.
Камера холодильная, обеспечивающая поддержание температуры от минус 5 аСдо минус 10 СС.
Термометржидкостный стеклянный по ГОСТ 28498.
Сосуд стеклянный с широким горлом и притертой пробкой вместимостью 500см3 по ГОСТ 25336.
Воронкастеклянная диаметром 100 мм по ГОСТ 25336.
Колбы Эрленмейера вместимостью 250 см3.
Колбы мерные вместимостью 50 см3с притертыми пробками по ГОСТ 1770.
Промыватели лабораторные стеклянные по ГОСТ 1770.
Стеклянная палочка по ГОСТ 1770.
Пробирка из пирекса длиной 180 мм идиаметром 18 мм.
Бюреткас краном вместимостью 25 см3по ГОСТ 1770.
Фильтры бумажные обеззоленные марки ФОМдиаметрами 70 и 180 мм.
Водадистиллированная по ГОСТ 6709.
Ацетон технический по ГОСТ2768.
Эфирэтиловый по ГОСТ22300. ч.
Трихлорэтилен по ГОСТ 9976, ч.
Ангидридуксусный поГОСТ 5815. ч.
Кислота серная по ГОСТ4204, ч.
Ситолабораторное с размером отверстий 250 мкм по ГОСТ4403.
5