ГОСТ Р 52810—2007
до pH 3.2 идобавляютдистиллированную воду в колбудо метки. Полученный растворфильтруютчерез
фильтрсразмерамипор0.45 мш Приготовленный растворацетатногобуферахранятпритемпературе
4 °С втечение 1мес.
в) Приготовление раствора сахарозы для разбавления образцов
(60.0±0.1)гсахарозы переносятвмернуюколбу вместимостью 100см3,прибавляют 50см3раство
ра ацетатного буфера, приготовленного по4.1.1.2 б), иперемешивают.
г) Приготовление раствора акриламида концентрации60 мг/см3
(6,0 i 0,1)гакриламида переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3,добавляют (0,30 ±0,01) г
N.N-метилбисакриламидаи(0.020±0,001)г аскорбиновой кислоты, доливаютв колбу растворацетатно
го буфера, приготовленного по 4.1.1.2 б), до метки и перемешивают. Приготовленный раствор акрила
мида хранят при температуре 4 °С в течение 1мес.
д) Приготовление раствора инициатора
Раствор готовят непосредственно перед анализом. (0,10 ± 0,01) г 7-водного сульфата железа (II)
переносят в мерную колбувместимостью 10 см3и растворяютдистиллированной водойдо метки.
е) Приготовление раствора катализатора
Раствор готовятнепосредственнопереданализом.В мерную колбувместимостью 10см3микропи
петкой со съемным наконечником вносят 0.33 см3пероксида водорода концентрации 30об.% идоводят
объемдо метки дистиллированной водой.
ж) Приготовление раствора трихлоруксусной кислоты концентрации 9,6 %
(96.0 ±0.1)г трихлоруксуснойкислоты переносят в мерную колбу вместимостью 1000см3и раство
ряютдистиллированной водойдо метки.
и) Приготовлениеосновного раствора кумасси бриллиантовогосинего G-250
(5,0 ± 0.1) г кумасси бриллиантового синего переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3 и
растворяют этиловым спиртом. Содержимое колбы перемешивают в течение 1ч на смесителе, после
чегофильтруютчерезбумажный фильтрдля удаления израствора неорганических солей.
к) Приготовление окрашивающего растворабриллиантового синего
Для приготовленияокрашивающего раствора смешивают5 см3основного раствора кумассибрил
лиантового синего. приготовленногопо4.1.1.2 и), и 95 см3раствора трихлоруксусной кислоты, приготов
ленного по4.1.1.2ж).
л) Приготовление раствора метилового зеленого
(0,50 ±0,01)г метилового зеленого переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3ирастворяют
этиловым спиртом. Содержимое колбы перемешивают в течение 1 ч. после чего фильтруют через
бумажный фильтр и разбавляют равным объемом растворасахарозы, приготовленного ло 4.1.1.2 в).
4.1.1.3 Подготовка лабораторной пробы макаронных изделий
Отбори подготовка проб— по ГОСТ Р 52377 со следующимдополнением.
Измельченную лабораторную пробу просеивают через лабораторное сито размером отверстий
500 мкм. отбирают пробудля анализа массой (0,20 л0.01) г и переносят ее в микроцентрифужную про
бирку,добавляют0,6 см3растворадля экстракции, приготовленного по4.1.1.2 а). Содержимое пробирки
перемешиваютв течение 10 с иоставляют на 1ч при температуре (20±5) еС. Раствор центрифугируютв
течение 5 мин и 0,2 см3центрифугата переносят в микроцентрифужную пробирку, содержащую 0,4 см
раствора сахарозы, приготовленного по4.1.1.2 в). Пробирку закрываюти перемешивают в течение 10с.
Приготовленный экстракт пробы хранят при температуре (4 ±2) °С не более 10дней.
4.1.1.4 Подготовка гелей
Дляприготовлениягеля вколбеБунзена с боковымотводом вместимостью250 см3смешивают30 г
раствора акриламида, приготовленного по4.1.1.2 г), и 0.075 см3раствора инициатора, приготовленного
по4.1.1.2 д). Дегазируют раствор вакуумным насосом в течение 2 мин при постоянном перемешивании.
Затем добавляют в колбу с гелем 0,12 см3раствора катализатора, приготовленного по 4.1.1.2 е). осто
рожно вращая колбу вручную в течение 10 с, избегая образования воздушных пузырей.
4.1.1.5 Подготовка к проведению анализа
Собирают кассеты для геля с промежутками мезду дорожками 1,5 мм.
Осуществляют сборку камеры для электрофореза, заполняют ее раствором ацетатного буфера,
приготовленным по 4.1.1.2 б), закрывают защитной крышкой и подсоединяют электроды к источнику
питания так. чтобы электрод верхней камеры являлся анодом и был присоединен к положительному (♦)
полюсу источника питания, а электрод нижней камеры — катодом, присоединенным к отрицательному
(-) полюсу источника литания. Включают источник питания.
В собраннуюкассетунепрерывнойструей выливаютрастворгеля, приготовленного по4.1.1.4. Пос
ле заполнения кассеты сразу вставляютгребенкудля образования лунок. Полимеризация заканчивает
ся через 5—10 мин. Процедуру рекомендуется проводить при температуре (20 ±2) еС.
4