ГОСТ Р 52810—2007
полученныйэкстрактдля удаления остатковцентрифугируютпри2400об/мин в течение 10мин при ком
натной температуре до получения прозрачного слоя надосадочной жидкости. Разбавляют надосадоч-
ную жидкость раствором, приготовленным по4.1.4.2 б), всоотношении 1:5.
г) Приготовление промывного раствора
Для приготовления промывного раствора разбавляют в мерной колбе вместимостью 1000 см3кон
центрат промывного раствора, входящего в состав испытательного комплекта, дистиллированной
водой в соотношении 1:9.
д) Приготовление конъюгаты пероксидазы антиглиадина
Концентрат конъюгаты, входящий всостав испытательногокомплекта, перед применением разво
дят промывным раствором, приготовленным по 4.1.4.2 г) в соотношении 1:19. Для 96 лунокдобавляют
0.6 см3 концентрата конъюгаты к 11.4 см3промывного раствора.
4.1.4.3 Проведение иммуноферментного анализа
Помещают микропипеткой вместимостью 100 мкл разбавленные по4.1.4.2 в) экстракты контроль
ных образцов и лабораторной пробы в соответствующие дублированные микролунки испытательного
комплекта.
П р и м е ч а н и е — При каждом отборе проб экстракта используют одноразовый наконечник.
Накрывают планшет и оставляют на 30 мин при температуре (20 ± 2) °С. В конце инкубационного
периода аспирируют содержимое всех лунок в первую колонку с помощью промывного аппарата для
микролунок. Затем заполняют лунки для каждой колонки промывным раствором, приготовленным по
4.1.4.2 г), идва раза последовательно повторяют процесс аспирации и заполнения лунок. Таким
обра зом. каждая колонка будет промыта три раза. После этого переворачивают планшет и стучат
над несколькими слоями впитывающего материала, чтобы удалить остатки капель промывного раствора
и пузырьки.
Затем вкаждуюмикролункумикропипеткойдобавляют 100 мкл приготовленной по4.1.4.2 д)конъю
гаты пероксидазы антиглиадина. закрываютиоставляют на 30 мин притемпературе (20±2) вС. Поисте
чении времени инкубации повторяют процедурупромывки лунок пять раз.
Микропипеткойдобавляют вкаждуюлунку по 100 мкл субстратаТМВ. входящего в испытательный
комплект, накрывают планшет и оставляют при температуре (20 ±2) °С на 30 мин. В лунках с контроль
ным первым образцом должна появиться синяя окраска, а в лунках с контрольным третьим образ цом
— ярко-синяя окраска.
Для качественного определения наличия муки из мягкой пшеницы в макаронных изделияхдоста
точно визуальнооценить появление в лункахокраски.
П р и м е ч а н и е — Для количественного определения наличия муки из мягкой пшеницы измеряют погло
щение раствора с помощью планшет-ридера. Осторожно размешивают содержимое планшета для того, чтобы
остановить развитие синей окраски. В каждую лунку равномерно добавляют микропипеткой по 50 мкл стоп-реаген
та. входящего в состав испытательного комплекта, при этом окраска меняется на желтую. Проводят контрольное
измерение для воздуха на планшет-ридере сфильтром 450 нм. Переносят 100 мкл из каждой лунки вкюветы план-
шет-ридера. добавляют по 900 мкл дистиллированной воды, перемешивают и измеряют поглощение раствора в
каждой лунке при 450 нм относительно воды — контрольного образца.
Содержание муки из мягкой пшеницы в макаронных изделиях определяют по калибровочной кривой, для это
го строят график зависимости значений поглощения для каждого контрольного образца.
4.2 Определение наличия красителей
4.2.1 Определение наличия красителей методом экстракции
Сущностьметода основана наэкстракциикрасителяизмакаронныхизделийспоследующим окра
шиванием шерстяной нити.
4.2.1.1 Аппаратура, материалы и реактивы
Весы лабораторные с допускаемой погрешностью взвешивания д0,1 г по ГОСТ24104.
Баня водяная, поддерживающая температуру воды от40 ССдо 98 °С.
Чашки выпарительныефарфоровые по ГОСТ 1770.
Часы по ГОСТ3145.
Спиртэтиловый поГОСТ 18300.
Водадистиллированная по ГОСТ6709.
Кислота винно-каменная по ГОСТ 5817.
Эфирдиэтиловый по нормативномудокументу.
Нить белая шерстяная по ГОСТ 17511.
Фильтры бумажные обезволенные марки ФОМ диаметром от 90 до 125 мм или бумага фильтро
вальная по ГОСТ 12026.
8