ГОСТ Р 52810—2007
Пробирку закупоривают, перемешивают вручную в течение 20 с для гомогенизации смеси и поме
щают втемное место на 15 °миндля появления окраски.
В зависимости от количества пальмитата (^-ситостерола в анализируемых образцах наблюдается
более или менее интенсивная изумрудно-зеленая окраска. В случае если продукт содержит муку из
одной твердой пшеницы, жидкостьоказывается неокрашенной.
Для измерения интенсивности окраски анализируемого образца используют фотометр с красным
фильтром при длине волны 640ц. Измерение проводят в течение 3—4 мин после извлечения пробирки из
темноты, так какокраска быстро изменяется. Для получения градуировочной зависимости использу ют
эфирные растворы пальмитата (i-ситостерола. полученные при определениях гравиметрическим
методом.
4.1.4Определение наличия муки из мягкой пшеницы тестовым комплектом BioKits PQC
(экспресс-метод)
Методоснованнаобнаруженииглиадина изгеномаDмягкойпшеницы, которыйотсутствуетутвер
дой пшеницы. В тестовом комплекте используют моноклональное меченое пероксидазой антитело для
связи с глиадином мягкой пшеницы.
4.1.4.1 Аппаратура, материалы иреактивы
Весы лабораторные с пределом допускаемой погрешности взвешивания ±0.001 г по ГОСТ24104.
Центрифуга с частотой вращения неменее 2400 об/мин.
Колбы Эппендорфадля центрифуги вместимостью 2 см3.
Микропипетка с наконечником, позволяющаядозировать50.100.500 мкл.
Склянка промывная вместимостью 500 см3.
Планшет-ридер микролунок, оснащенный интерференционным фильтром 450 нм.
Спиртэтиловый по ГОСТ 18300.
Водадистиллированная по ГОСТ 6709.
Дитиотреитол (ДТТ) [8].
Ситолабораторное размером отверстий 90 и250 мкм поГОСТ4403.
Испытательный комплект P.Q.C. BioKits:
- контрольныеобразцы макаронныхизделий, изготовленные измукитвердойпшеницы сдобавле
нием 3 %, 5 %. 10 %. и 15 % муки мягкой пшеницы, высушенные при 100 X ;
- контрольныйобразецмакаронныхизделий, изготовленный измукитвердой пшеницысдобавле
нием4 % — 7% муки мягкой пшеницы, высушенный при 60 X ;
- концентрат конъюгата пероксидазы антиглиадина в фосфатно-буферном солевом растворе с
BSA со стабилизатором итиомерсалом;
- субстрат, содержащийтетраметилбензидин (ТМВ);
- концентрат промывного раствора — десятикратный концентрат забуференного раствора Tris с
увлажняющим веществом иконсервантами;
- кислотный стоп-реагент, содержащий 25 %фосфорной кислоты;
- модульмикролунок, содержащий 12полосокмикролунок(96лунокдля анализа), расположенных
в пластиковой раме.
Допускается использование другой аппаратуры и материалов, не уступающих перечисленным
выше по метрологическим, техническим характеристикам, а также реактивов по качеству не ниже ука
занных.
4.1.4.2 Подготовка к проведению анализа
а) Отбор пробы
Отбор иподготовкалабораторной пробы — по ГОСТ Р 52377.
Измельченную пробу просеивают через сита размером отверстий90 и 250 мкм.
б) Приготовление растворадля экстракции и разбавления
Растворыдля экстракции и разбавления готовят непосредственно передих использованием.
Для приготовления раствора для экстракции 70%-ной объемной концентрацией этилового спирта
смешивают 7 см3этилового спирта с 3 см3дистиллированной воды и перемешивают в мерной колбе
вместимостью 10 см3. После этого к растворудобавляют 1% дитиотреитола и перемешивают.
Для приготовления растворадля разбавления образцов смешивают 7 см3этанола с 3 см3дистил
лированной воды иперемешивают в мерной колбе вместимостью 10 см3.
в) Подготовка материалов испытательного комплекта
Из контрольных образцов, входящих в испытательный комплект, а также из лабораторной пробы,
подготовленной по 4.1.4.2 а), отбирают пробудля анализа массой (0.10 ± 0,01) г и переносят ее в колбу
Эппендорфа. Добавляютв колбу1 см3растворадляэкстракции, приготовленногопо4.1.4.2 б),герметич
ноее закрываюти перемешиваютобразецв колбе путем переворачивания втечение60 мин.Послеэтого
7