ГОСТ 33638-2015; Страница 33

или поделиться

Ещё ГОСТы из 41757, используйте поиск в верху страницы

ГОСТ 1.0-2015 Межгосударственная система стандартизации. Основные положения (Настоящий стандарт устанавливает цели и принципы межгосударственной стандартизации, основные направления работ и объекты межгосударственной стандартизации, организационные основы межгосударственной системы стандартизации, категории документов по межгосударственной стандартизации и правила их применения) ГОСТ 33639-2015 Методы испытаний химической продукции, представляющей опасность для окружающей среды. Испытание по оценке эмбриональной токсичности на навозных двукрылых мухах (Настоящий стандарт устанавливает метод оценки влияния испытуемого химического вещества на развитие стадий навозных двукрылых мух, заселяющих навоз. В данном стандарте насекомые подвергаются воздействию в контролируемых условиях [15] обогащенного химическим веществом навоза. Расширенное испытание, в котором мухи подвергаются воздействию навоза скота, обработанного испытуемым веществом, описано в приложении В) ГОСТ Р 56810-2015 Композиты полимерные. Метод испытания на изгиб плоских образцов (Настоящий стандарт распространяется на неармированные и армированные материалы, в том числе на слоистые полимерные композитные материалы (ПКМ), армированные непрерывными волокнами)

Страница 33

Страница 1

Untitled document

ГОСТ 33638—2015

Приложение М

(рекомендуемое)

Руководство по процедуре искусственного оплодотворения для трехиглой колюшки

Целью этого раздела является описание процедуры получения оплодотворенных яйцеклеток трехиглой ко

люшки с учетом их использования в FSDT.

Процедуры

Получение сперматозоидов от самцов

1 Самца с хорошим окрасом из требуемой популяции подвергают эвтаназии.

2 Семенники извлекают с каждой стороны рыбы. Семенники обычно сильно пигментированы, представляют

органы палочкообразной формы, которые хорошо видны на латеральной средней линии тела. Используют один из

следующих методов:

а) с помощью пары тонких ножниц, начиная с клоаки, делают разрез длиной 1,0-1,5 см под углом примерно

в 45".

б) используя скальпель, делают небольшой разрез в боку рыбы немного сзади от таза и вентральнее боко

вых пластин.

3 Семенники извлекают с помощью тонких щипцов и помещают в чашку Петри.

4 Каждый семенник покрывают 100 мкл свежеприготовленного конечного раствора Хэнкса*.

5 Семенники мелко измельчают, используя лезвие бритвы или скальпель. Такая манипуляция приводит к

освобождению спермы, и раствор Хэнкса становится молочного цвета.

’ Буферный солевой раствор Хэнкса (БСРХ)

БСРХ необходим для сохранения спермы, пока идет подготовка к оплодотворению. Важное примечание:

хотя большинство необходимых исходных стоковых растворов может быть приготовлено заранее, стоковый рас

твор 5 и затем конечный раствор должен быть свежеприготовленным, т. е. готовится в день использования.

Стоковый раствор 1:

NaCI -

KCI -

дистиллированная вода —

8.00 г;

0.40 г;

100мл

Стоковый раствор 2:

Na2HP04 (безводный) —

КН2Р04 -

Дистиллированная вода —

0.358 г;

0.60 г;

100 мл

Стоковый раствор 3:

СаС -

Дистиллированная вода —

0.72 г;

50 мл

Стоковый раствор 4:

MgS04.7H20 -

Дистиллированная вода —

1.23 г;

50 мл

Стоковый раствор 5 (свежеприготовленный):

NaHC03 -0.35 г;

Дистиллированная вода —10 мл

П р и м е ч ан и е — Если имеются в наличии некоторые из вышеуказанных солей, но с другим содержанием

воды (т. е. 2НгО вместо безводного), то их можно использовать, но сначала необходимо скорректировать массу

с учетом молекулярной массы.

Для конечного раствора Хэнкса растворы объединяют в следующем порядке:

1 Стоковый раствор 11.0 мл

2 Стоковый раствор 2 0.1 мл

3 Стоковый раствор 3 0,1 мл

4 Дистиллированная вода 8.6 мл

5 Стоковый раствор 4 0,1мл

6 Стоковый раствор 5 0,1 мл

Перед использованием хорошо перемешивают.