ГОСТ 33638—2015
6.5 Вода
В качество испытуемой воды подходит любая вода, в которой тестовые виды в контроле выжива
ют по меньшей мере также. как в воде, описанной в приложении Б. Она должна быть постоянного каче
ства в течение всего периода испытания. В целях гарантии того, что вода для разведения не
оказывает существенного влияния на результаты испытания (например, за счет взаимодействия с
испытуемым веществом) или негативно воздействует на производительность родительского стада,
через опреде ленные интервалы времени отбирают воду для анализа. Такие показатели, как общий
органический углерод, проводимость. pH и содержание взвешенных твердых частиц измеряют,
например, раз в три месяца, когда известно, что вода для разведения относительно постоянна по
своему качеству. Изме рения тяжелых металлов (например. Си. Pb. Zn, Hg. Cd. Ni). основных анионов
и катионов (например, Са. Mg. Na, К. Cl, S04) и пестицидов необходимо проводить, если качество
воды вызывает сомнение. Подробная информация о химическом анализе и отборе проб воды
приведена в 7.4.1.
6.6 Испытуемые растворы
6.6.1 Если это возможно с практической точки зрения, то используют проточную систему. При про
ведении испытаний с проточным дизайном для доставки серии концентраций в испытательные камеры
необходима система, непрерывно дозирующая и разбавляющая исходный стоковый раствор испытуе
мого вещества (например, дозирующий насос, пропорциональный разбавитель и сатурационная систе
ма). Скорость потоков растворов и воды для разведения проверяют через определенные интервалы
времени в ходе испытания, и они не должны изменяться более чем на 10 % в течение всего испытания.
Подходящая скорость потока составляет не менее пяти объемов испытательных камер за 24 ч [4]. Не
используют пластиковые трубки или другие материалы, содержащие биологически активные химиче
ские вещества или вещества, адсорбирующие испытуемое вещество.
6.6.2 Стоковый раствор предпочтительно готовят без использования растворителей простым сме
шиванием или перемешиванием испытуемого вещества в воде для разведения с помощью механиче
ских средств (например, встряхиванием или ультразвуком). Если испытуемое вещество трудно рас
творимо в воде, то используют процедуры, описанные в Руководстве ОЭСР по работе с веществами, с
которыми трудно проводить манипуляции (38]. Предпочтительно растворитель не используют, но в
некоторых случаях он применяется для получения достаточно концентрированного стокового раствора.
Примеры подходящих растворителей приведены в ссылке (38].
6.6.3 Следует избегать лолустатических условий испытаний, если только на то не имеются веские
причины, связанные с испытуемым веществом (например, его стабильностью, ограниченной доступно
стью. высокой стоимостью или опасностью при применении). Для полустатического метода выполняют
две различные процедуры восстановления. В первом случае новые испытуемые растворы готовят в
чистых камерах, и выжившие яйца и личинки осторожно переносят в новые камеры, во втором тесто
вые организмы остаются в испытательных камерах, а часть (не менее двух третей) испытуемой воды
меняется ежедневно.
7 Проведение испытания
7.1 Условия воздействия
7.1.1 Сбор яиц и продолжительность
Для предупреждения генетического смещения яйца собирают минимум от трех пар или групп,
предназначенных для разведения, смешивают и произвольно отбирают для начала испытания. Опи
сание искусственного оплодотворения для трехиглой колюшки приведено в приложении
Л
. Испытание
начинают как можно раньше после оплодотворения яиц. предпочтительно эмбрионы погружают в ис
пытуемые растворы, прежде чем начнется расщепление бластодиска, или сразу же после этой стадии и
не позднее 12 ч после оплодотворения. Испытание продолжается до завершения половой диффе
ренциации в контрольной группе (60 сут после вылупления для японской оризии. трехиглой колюшки и
данио-рерио).
7.1.2 Загрузка
В начале испытания число оплодотворенных яиц должно составлять не менее 120 на каждую кон
центрацию. которые разделяют между не менее четырьмя повторностями (для контроля принято рас
пределение квадратный корень). Яйца произвольно распределяют (с помощью статистических таблиц
5