ГОСТ 33638—2015
и температуру. Один раз в неделю измеряют как минимум содержание растворенного кислорода, со
леность (при необходимости) и температуру, в то время как pH. проводимость и жесткость — в начале и
конце испытания. Температуру желательно контролировать постоянно как минимум в одной испыта
тельной камере.
7.4.3Результаты должны основываться на измеренных концентрациях. Однако если концентра
ция испытуемого вещества в ходе всего испытания в растворе сохранялась на удовлетворительном
уровне, например в пределах
±
20 % номинальной концентрации, то результаты могут основываться на
номинальных или на измеренных значениях концентрации испытуемого вещества.
7.5 Наблюдения и измерения
7.5.1 Стадия эмбрионального развития
Воздействие начинают сразу же после оплодотворения до расщепления бластодиска и не позд
нее 12 ч после оплодотворения для того, чтобы охватить стадии раннего эмбрионального развития.
7.5.2 Вылупление и выживаемость
Наблюдения за вылуплением и выживаемостью проводят не менее одного раза в сутки, и дан
ные регистрируют. Мертвые эмбрионы, личинки и молоди рыбы удаляют сразу же при обнаружении,
поскольку они быстро разлагаются и оказывают негативное действие на других рыб. Особую осторож
ность следует соблюдать при удалении мертвых особей, чтобы не ударить и физически не повредить
прилегающие к ним яйца/личинки. которые являются очень хрупкими и чувствительными ко всякому
воздействию. Критерии гибели различаются в зависимости от стадии развития:
- для яиц. особенно на ранних стадиях, имеет место потеря прозрачности и изменение окраски,
вызванные свертыванием и/или осаждением белка, что приводит к появлению белого матового внеш
него вида:
- для личинок и молоди рыб неподвижность и/или отсутствие дыхательных движений, и/или от
сутствие сердечных сокращений, иУили белая матовая окраска центральной нервной системы, и/или
отсутствие реакции на механические раздражители.
7.5.3 Аномальный внешний вид
Регистрируют количество личинок или рыб с аномальной формой тела и описывают внешний
вид и характер аномалий. Необходимо отметить, что аномальные эмбрионы и личинки встречаются и
в норме, и для некоторых видов могут составлять порядка нескольких процентов в контроле(ях). Ано
мальных особей удаляют из испытательных камер только в случае гибели. Однако это может противо
речить некоторым принятым локальным правилам, и если отмечаются значительные страдания (с уве
ренностью можно прогнозировать очень тяжелый и летальный исход), то рыбу подвергают анестезии и
эвтаназии согласно 5.6.1 и учитывают как гибель при анализе данных.
7.5.4 Аномальное поведение
По внешнему виду регистрируют аномалии, например гипервентиляцию, нескоординированное
плавание, аномальную неподвижность и атипичное пищевое поведение.
7.5.5 Масса
В конце испытания всех выживших рыб подвергают эвтаназии (анестезию проводят при отборе
пробы крови) и измеряют индивидуальную массу тела (после промакивания насухо).
7.5.6 Длина
7.5.6.1 В конце испытания измеряют длину тела у отдельных рыб (стандартную длину).
7.5.6.2 Результаты указанных измерений являются основой части или всех следующих данных,
приводимых в отчете:
- общая гибель:
- число здоровой рыбы в конце испытания;
- время начала и окончания вылупления;
- длина и масса выживших особей;
- число деформированных личинок;
- число рыб. проявляющих аномальное поведение.
7.6 Отбор рыбы
Отбор рыбы проводят в конце испытания. Отобранную рыбу подвергают эвтаназии, например с
использованием MS-222 (100-500 мг на 1 л. забуференном 200 мг NaHCOaна л) или FA-100 (4-аллил-2-
метоксифенол: эвгенол), и измеряют сырую массу каждой рыбы (после промакивания насухо) или
проводят анестезию, если требуется отобрать пробы крови (см. 7.7.2.3).
7