21
1мл, обозначается N, Проверяется, что содержание микроорганизмов в исходной суспензии составляет > 108 для бактерий или > 107 для клеток грибов или спор бактерий в 1мл;
Тест В. Два контрольных образца загрязняются 0,5мл суспензии, содержащей от 30 до 300 жизнеспособных единиц в 1мл. Два других контрольных образца загрязняются 0,5мл суспензии, содержащей от 300 до 3000 жизнеспособных единиц в 1мл. Эти четыре контрольных образца загрязняются, а затем контролируются так же, как и испытуемые образцы, но они не проходят стадию обработки (аттестуемым процессом). Затем эти образцы помещаются в питательный агар и инкубируются. После этого подсчитывается число жизнеспособных единиц. Среднее число жизнеспособных единиц, соответствующее более загрязненным образцам, обозначается 
, а аналогичное число для менее загрязненных образцов - 
.
Тест С. На один контрольный образец наносится 0,5мл белкового раствора С (Е.2.3.3). Этот образец проходит полный цикл обработки. Затем он погружается в 100мл среды для смыва микроорганизмов, встряхивается в течение 15-30с, после чего помещается в чашку Петри. Затем на контрольный образец наносится 1мл суспензии, содержащей от 30 до 3000 жизнеспособных единиц. Далее образец покрывается 10мл агаровой среды, инкубируется и затем подсчитывается число проросших единиц. Это число обозначается nу 100мл ранее использованной среды для смыва микроорганизмов фильтруется через мембранный фильтр, удерживающий микроорганизмы. После трехкратного ополаскивания на фильтр наносится 50мл новой среды для смыва микроорганизмов. К 50мл среды для смыва микроорганизмов добавляется 1мл суспензии, содержащей от 30 до 300 жизнеспособных единиц в 1мл с последующим фильтрованием. Фильтр и фильтровальное устройство ополаскиваются 50мл новой среды для смыва микроорганизмов, которая также фильтруется. После чего фильтр помещается на агаровую среду, инкубируется и подсчитывается число выросших жизнеспособных единиц. Полученное число обозначается n2. Затем вычисляется среднее значение n = (n1+n2)/2.
Если 
, то условия испытаний считаются приемлемыми (аттестованными) для проведения аттестации процесса обработки.
Если 
≤0,5N и/или ≤0,05л7, и/или n≤0,05N, то условия испытаний для аттестации процесса обработки неприемлемы. Следует повторить вышеприведенные операции, например, добавив соответствующие компоненты для нейтрализации остатков химических веществ в контрольных образцах, подвергаемых обработке по аттестуемому методу.
Е.2.6.2 Испытания образцов
Смешиваются 3мл суспензии микроорганизмов (Е.2.5) и 2мл раствора белкового раствора С (Е.2.3.3) и инкубируются в течение 5мин. при комнатной температуре. На испытуемый образец наносится 0,5мл полученной суспензии. Испытания для микроорганизмов каждого вида проводятся не менее трех раз.
После обработки аттестуемым процессом контрольные образцы передаются в лабораторию как можно быстрее. Каждый образец помещается в 100мл среды для смыва микроорганизмов, которая перемешивается в течение 15-30с. После этого выполняются следующие операции:
a) 0,1 мл получившегося раствора помещается в 9,9мл среды для смыва и перемешивается. Получившиеся 10мл среды трижды смываются на фильтр 50мл новой среды для смыва. Затем фильтр помещается на агаровую питательную среду и инкубируется;
b) 1мл раствора наносится на фильтр и трижды смывается 50мл новой среды для смыва. Затем фильтр помещается на агаровую питательную среду и инкубируется;
c) оставшиеся 98,9мл раствора наносятся на фильтр и трижды смываются 50мл новой среды для смыва. Затем фильтр помещается на агаровую питательную среду и инкубируется;
d) каждый испытуемый образец помещается на чашку Петри в асептических условиях, покрывается агаром и инкубируется.
Далее подсчитываются: