28
Приложение ДВ
(обязательное)
Методыподсчетаплотности (численности)
клетокводорослей
ДВ.1 Определение плотности (численности) клеток водорослей методом прямого подсчета
в камере Горяева
Подсчет плотности (численности) клеток водорослей в камере Горяева (см. рисунок ДВ.1) проводят
следующим способом:
Содержимое колбы с водорослями перемешивают вручную, затем пипеткой отбирают суспензию во-
дорослей (аликвоту) и наносят по одной капле на верхнюю и нижнюю части сетки счетной камеры Горяева.
Затем камеру накрывают покровным стеклом, которое притирают по бокам до появления колец интерфе-
ренции.
П р и м е ч а н и я
1 Взятую в пипетку каплю суспензии водорослей необходимо очень быстро нанести на поверхность
сетки, пока клетки водорослей не успели осесть в нижней части пипетки.
2 Нанесенную на поверхность сетки каплю суспензии водорослей следует быстро накрыть покровным
стеклом и притереть его во избежание оседания клеток водорослей из капли.
3 После притирания покровного стекла и при подсчете клеток водорослей под микроскопом необходи-
мо следить за тем, чтобы жидкость под покровным стеклом была распределена равномерно.
4 Камеры Горяева обычно имеют две сетки, разделенные желобком. В таких камерах наносят парал-
лельно две капли суспензии водорослей.
Капли суспензии водорослей наносят не подряд из одной пипетки, а при двукратном взятии суспензии
в пипетку из одной и той же колбы.
Через 1—2 мин после оседания клеток водорослей камеру Горяева помещают под объектив микроскопа
и подсчитывают количество клеток водорослей во всех 25 больших квадратах сетки.
П р и м е ч а н и я
1 После подсчета клеток водорослей камеру Горяева сразу же тщательно моют водопроводной водой
и протирают мягкой тканью (например, фланелью).
2 Подсчет числа клеток водорослей в камере Горяева рекомендуется проводить при плотности (чис-
ленности) клеток (1,0—2,5)
·
10
6
клеток/см
3
, так как при бóльшей плотности (численности) клеток водо-
рослей в суспензиях подсчет трудоемок и менее точен.
Допускается при подсчете численности клеток водорослей разбавление суспензии культуры водорос-
лей питательной средой (например, разбавление в 10 раз при большой плотности клеток в исходной куль-
туре, тогда численность клеток, полученную при подсчете в камере Горяева, умножают на коэффициент
разбавления 10).
Рисунок ДВ.1 — Счетная камера Горяева
ГОСТР 54496—2011