18
2 Определение начальной плотности (численности) клеток водорослей проводят аналогично 5.4.3.1 с уче-
том условий тестирования по 6.4.1 и подготовки водорослей по ДБ.2.2 (приложение ДБ).
3 Номинальная плотность (численность) клеток водорослей может быть использована в качестве началь-
ной плотности (численности) клеток водорослей, и в таком случае не требуется подсчет (измерение) начальной
плотности (численности) клеток водорослей перед тестированием.
6.4.5 Для приготовления контрольной пробы используют питательную среду по ДА.2.2(приложе-
ниеДА).
6.5 Обработкарезультатовтестирования — по 5.5 сучетомрасчетовэффективнойкратностираз-
бавления (эффективнойконцентрации), какуказанониже.
6.5.1 Построениеграфическойзависимостискоростиростаклетокводорослейотпродолжи-
тельноститестирования
Длякаждойкратностиразбавления(концентрации) анализируемойпробы (втомчислеиконтрольной)
строятграфикскоростиростаклетокводорослейввидезависимостилогарифмасреднеарифметических
значенийплотности(численности)клетокводорослейотпродолжительноститестирования.
6.5.2 Определение скорости роста клеток водорослей
Длякаждойкратностиразбавления (концентрации) анализируемойпробырассчитываютскорость
ростаклетокводорослей
m
i
, клеток/ч, поформуле
t
m
i
=
lgx
L
−
lgx
0
,(3)
3
3
где x
L
— среднеарифметическоезначениеплотности(численности)клеток водорослейванализируемой
пробевконцетестирования, клеток/см ;
x
0
— среднеарифметическоезначениеплотности(численности)клетокводорослейванализируемой
пробевначалетестирования, клеток/см ;
t — продолжительностьтестирования, ч.
Аналогичнопоформуле (3) рассчитываютсреднеарифметическоезначениескоростиростаклеток
водорослейвконтрольнойпробе (
m
c
).
6.5.3 Замедление скорости роста клеток водорослей
I
m
i
, %, для каждой заданной кратности
разбавления (концентрации) анализируемойпробырассчитываютпоформуле
m
m
i
I
=
m
c
− m
i
×
100,
c
(4)
где
m
c
— среднеарифметическое значение скорости роста клеток водорослей в контрольной пробе,
клеток/ч;
m
i
— среднеарифметическое значение скорости роста клетокводорослейванализируемойпробе,
клеток/ч.
6.5.4 Определениеэффективнойкратностиразбавления (концентрации)
Длякаждойзаданнойкратностиразбавления (концентрации) анализируемойпробырассчитывают
поформуле (4) значение замедления скорости роста клеток водорослей в процентах, с использова-
нием формулы (3) или, используя график скорости роста (см. 6.5.2), определяютзначение 72 чЭКР
50
(72 чЭК
50
) взависимостиотанализируемойпробы.
Примеропределенияэффективнойконцентрациивеществапозамедлениюскоростиростакле-
токводорослейприведенвприложенииДЖ.
Если по полученным результатам не удалось определить конкретное значение 72 ч ЭКР
50
(72 чЭК
50
), тодляопределенияэтогозначенияиспользуютпробит-анализ. Аналогичныйпримерприведен
вприложенииДД.
6.5.5 Результатытестированиясчитаютдостоверными, еслисоблюдаютсяследующиеусловия:
а) плотность(численность)клетокводорослейвконтрольнойпробевозросланеменеечемв 67 раз
через 72 чтестирования.
П р и м е ч а н и е — Такое увеличение плотности (численности) клеток водорослей соответствует
скорости роста клеток 1,4 сут
–1
;
b) коэффициентколебанийтемповростаклетокводорослейвконтрольныхпробахвкаждойизтрех
колбтестируемойсериианализируемыхпробвтечениетестированиядолженбытьнеболее 5 % относи-
тельносреднеарифметичекогозначенияплотности(численности)клетокводорослей;
ГОСТР 54496—2011