12
5.4.1 Предварительноетестирование
Предварительноетестированиепроводятдляустановлениядиапазонаразбавлений (концентраций)
проб,впределах которого необходимо провести окончательноетестированиедляопределениязначения
72 ч ЭКР
50
(96 ч ЭКР
50
) или 72 ч ЭК
50
в зависимости от анализируемых проб.
Припредварительномтестированииисследуютширокуюобластьразбавлений(неменеепяти) сточ-
ныхвод, водныхвытяжекиконцентрациираствороввещества, выбираемыхвгеометрическойпрогрес-
сии, приэтом, какправило, используюткоэффициент 10 междуразбавлениями (концентрациями).
Припредварительномтестированииприменяютнеменеедвухколбнакаждуюзаданнуюкрат-
ностьразбавления(концентрацию)анализируемойпробы.
Процедурапредварительноготестирования — по 5.4.3.
Примерпроведенияпредварительноготестированияиустановлениядиапазонаконцентрацийве-
щества, впределахкоторогонеобходимопроводитьокончательноетестирование, приведенвприло-
женииДЕ.
5.4.2 Окончательноетестирование
Порезультатампредварительноготестирования (см. 5.4.1) поустановлениюдиапазонаразбав-
лений (концентраций) подготавливаютанализируемыепробыдляокончательноготестированияанало-
гичноподготовкеанализируемыхпробпо 5.3.2.6 дляпредварительноготестирования, носиспользова-
ниемкоэффициентамеждуразбавлениями (концентрациями), какправило, 2,0 или 2,5.
Дляокончательноготестированияиспользуютнеменеепятиразбавлений(концентраций) анали-
зируемыхпроб, приэтомкратностьразбавления (концентрации) пробнеобходимо, повозможности, под-
бирать, основываясьнарезультатахпредварительноготестирования,такимобразом, чтобыобеспе-
чить два уровня сниженияплотности (численности) клеток водорослей ниже и выше предполагаемого
значенияЭК
50
(ЭКР
50
).
Дляокончательноготестированияприменяютнеменеетрехколбнакаждуюзаданнуюкратность
разбавления (концентрацию).
Процедураокончательноготестирования— по 5.4.3.
Примерпроведенияокончательноготестированияиустановлениезначенийэффективнойкон-
центрации 72 чЭК
50
длявеществаприведенвприложениеДЕ.
П р и м е ч а н и е — Исходя из статистических данных, схема тестирования может быть изменена,
например, уменьшено количество колб с анализируемыми пробами для каждого разбавления (концентрации) за
счетувеличенияколичестватестируемыхразбавлений (концентраций) пробыисокращениякоэффициента между
разбавлениями (концентрациями) анализируемой пробы.
5.4.3 Процедуратестирования
5.4.3.1 Вкаждуюколбу(см. 5.4.1 и 5.4.2) вместимостью 250 см
3
вносятпо 100 см
3
анализируемой
пробы, затемвкаждуюколбудобавляютрассчитанныйобъемсуспензииводорослейвэкспоненциаль-
нойфазероста (см. 5.3.4),перемешивают, выдерживают 30 минпритемпературеиосвещенностипо
5.4.3.4 иопределяютплотность(численность)клетокводорослей, соответствующуюначалутестиро-
вания, однимизметодов, приведеннымвприложенииДВ.
Плотность(численность)клетокводорослейвначалетестированиядолжнанаходитьсявпределах
2,0
·
10
4
— 2,5
·
10
4
клеток/см
3
.
5.4.3.2Длякаждойанализируемойпробы(разбавлений,концентраций) подготавливаютконтрольную
пробуследующимспособом:вконическиеколбывместимостью 250 см
3
вносятпо 100 см
3
питательной
средыПрата [см. ДА.1.2 (приложениеДА)],добавляютпо 1,0 см
3
суспензииводорослейвэкспоненциаль-
нойфазероста(см. 5.3.4), перемешивают, выдерживают 30 минпритемпературеиосвещенностипо
5.4.3.4 иопределяютплотность(численность)клетокводорослейсоответствующуюначалутестирования
однимизметодов, приведеннымвприложенииДВ.
Плотность (численность) клетокводорослейвконтрольнойпробедолжнанаходитьсявпределах
2,0
·
10
4
— 2,5
·
10
4
клеток/см
3
.
П р и м е ч а н и я
1 Чтобы получить в начале тестирования плотность (численность) клеток водорослей в пределах
от 2,0
·
10
4
до 2,5
·
10
4
клеток/см
3
, достаточно в каждую колбу внести 1,0 см
3
суспензии водорослей из
культуры, плотность (численность) которой находится в пределах от 2,0
·
10
6
до 2,5
·
10
6
клеток/см
3
.
2 При проведении тестирования контрольные пробы готовят в двух колбах — для предварительного
тестирования; в трех колбах — для окончательного тестирования.
ГОСТР 54496—2011